Lox基因RNAi轉(zhuǎn)基因小麥后代株系種子耐儲藏性分析
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更多相關(guān)文章: 耐儲藏性 轉(zhuǎn)基因小麥 脂氧合酶(LOX) 人工加速老化 發(fā)芽率
【摘要】:小麥(Triticum aestivum)種子中脂氧合酶(lipoxygenase,LOX)可催化不飽和脂肪酸的氧化作用,在種子儲藏期間產(chǎn)生氫過氧化物,導(dǎo)致小麥種子在儲藏過程中種子活力和營養(yǎng)品質(zhì)降低。因此,選育種子LOX活性低的小麥品種是小麥遺傳改良的任務(wù)之一。為了獲得種子脂氧合酶活性顯著降低、外源Lox RNAi構(gòu)件(Lox gene RNAi construct,Loxi)能穩(wěn)定遺傳且種子耐儲藏性增強(qiáng)的轉(zhuǎn)基因小麥新種質(zhì),本研究以小麥西農(nóng)889、閆麥8911和陜優(yōu)225轉(zhuǎn)Loxi穩(wěn)定遺傳的TF7代轉(zhuǎn)基因株系為材料,對轉(zhuǎn)基因種子中Lox基因家族進(jìn)行了半定量RT-PCR分析,結(jié)果表明,外源Loxi可有效抑制小麥籽粒中小麥脂氧合酶1(Triticum aestivum lipoxygenase 1,Ta Lox1)基因的表達(dá),但小麥脂氧合酶2(Triticum aestivum lipoxygenase 2,Ta Lox2)和小麥脂氧合酶3(Triticum aestivum lipoxygenase 3,Ta Lox3)基因的表達(dá)量不變;對3個親本及16個TF7代轉(zhuǎn)基因株系的種子脂氧合酶活性檢測,結(jié)果顯示,與其親本相比,轉(zhuǎn)基因株系種子脂氧合酶活性顯著降低;對人工加速老化處理7和14 d的轉(zhuǎn)基因和對照種子分析發(fā)現(xiàn),隨著老化天數(shù)的增加種子活力降低,但轉(zhuǎn)基因株系種子活力均顯著高于其親本材料;人工加速老化后脂肪酸組分和含量測定分析表明,轉(zhuǎn)基因株系脂肪酸比其親本材料氧化損失少。以上結(jié)果說明,轉(zhuǎn)基因株系中Lox基因的RNAi可有效抑制其種子LOX活性,使轉(zhuǎn)基因小麥后代種子耐儲藏性增強(qiáng);篩選鑒定得到的種子LOX活性顯著降低且耐儲藏性增強(qiáng)的轉(zhuǎn)基因小麥株系可為小麥育種提供新的材料。
【作者單位】: 旱區(qū)作物逆境分子生物學(xué)國家重點實驗室;西北農(nóng)林科技大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 耐儲藏性 轉(zhuǎn)基因小麥 脂氧合酶(LOX) 人工加速老化 發(fā)芽率
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(No.31471482和No.31101205) 轉(zhuǎn)基因生物新品種培育重大專項(No.2008ZX08002004和No.2011ZX08002004)
【分類號】:S512.1
【正文快照】: 種子的老化是種子儲藏過程中普遍存在的一種現(xiàn)象,不僅影響種子萌發(fā)與幼苗的生長,也會影響到后期植株的產(chǎn)量與品質(zhì)。關(guān)于種子老化的原因普遍認(rèn)為,種子生理成熟時,內(nèi)部發(fā)生的一系列生理生化變化,造成例如膜結(jié)構(gòu)(毛培勝等,2008)、種子成分(Saldivar et al.,2011)、酶活性(汪仁等,
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