共表達(dá)PCV2 ORF2和豬IL-18基因的重組豬偽狂犬病毒對(duì)小鼠的免疫原性
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【摘要】:【目的】研制豬偽狂犬病毒(PRV)和豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)的二聯(lián)活疫苗,并用豬IL-18作為免疫佐劑!痉椒ā繉⒇iIL-18基因插入到質(zhì)粒p GO中,獲得的重組轉(zhuǎn)移質(zhì)粒p GO18與豬PRV弱毒HB98株DNA共轉(zhuǎn)染ST細(xì)胞,并進(jìn)行空斑篩選和純化;RT-PCR和Western blot分別從轉(zhuǎn)錄和蛋白水平鑒定其表達(dá)情況。將重組病毒PGO18和PGO、PRV弱毒株HB98、PCV2滅活商品苗和1640細(xì)胞培養(yǎng)基分別免疫6周齡雌性昆明小鼠,4周后二次免疫,二免后4周用PCV2 DF強(qiáng)毒和PRV Min/A強(qiáng)毒接種小鼠。通過(guò)ELISA、血清中和試驗(yàn)和流式細(xì)胞術(shù)及攻毒保護(hù)試驗(yàn)評(píng)價(jià)重組病毒的免疫原性!窘Y(jié)果】獲得了重組病毒PGO18,并且可在ST細(xì)胞內(nèi)表達(dá);PGO18可誘導(dǎo)小鼠機(jī)體產(chǎn)生PCV2的ELISA和PRV的中和抗體水平,刺激CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞亞群的增殖,且能有效抵抗PCV2和PRV強(qiáng)毒攻擊。【結(jié)論】IL-18基因可增強(qiáng)重組病毒的免疫效果,使重組病毒具有良好的免疫原性,有望成為防治PCV2和PRV的候選疫苗株。
【作者單位】: 河南農(nóng)業(yè)大學(xué)鄭州市豬重大疫病防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;河南省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心;
【關(guān)鍵詞】: PCV ORF IL- 重組偽狂犬病毒 免疫效力
【基金】:河南省產(chǎn)學(xué)研項(xiàng)目(132107000002) 河南省基礎(chǔ)與前沿技術(shù)研究計(jì)劃項(xiàng)目(142300410156) 河南省教育廳科學(xué)技術(shù)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(14A230002)~~
【分類號(hào)】:S852.4
【正文快照】: 斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)主要由豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)引起,PCV2還與多種疾病相關(guān),統(tǒng)稱為豬圓環(huán)病毒病。主要感染豬的皮膚和粘膜組織,導(dǎo)致相應(yīng)部位上皮組織發(fā)生增生性病變,還可加重豬呼吸和繁殖障礙綜合征病毒和豬細(xì)小病毒等感染,F(xiàn)已確認(rèn)豬圓環(huán)病毒病在全世界都有發(fā)生,
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,本文編號(hào):744578
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