本文關(guān)鍵詞：遺傳穩(wěn)定型六六六、甲基對(duì)硫磷降解基因工程菌的構(gòu)建及特性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

通過轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)同源重組的方法,將甲基對(duì)硫磷水解酶基因mpd導(dǎo)入到六六六降解菌BHC-A的染色體上,構(gòu)建了能同時(shí)降解六六六和甲基對(duì)硫磷的基因工程菌BHC-A-mpd.對(duì)其生長(zhǎng)特性和降解特性的研究表明,工程菌在LB培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)特性與原始菌株沒有差別,生長(zhǎng)至對(duì)數(shù)期A600 nm值都可達(dá)到2.5;對(duì)六六六的降解特性和原始菌株相同,可在10 h內(nèi)將5 mg/L的六六六完全降解.mpd基因在BHC-A-mpd中穩(wěn)定表

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第 2年第 209 7 7期 08卷月

環(huán)

境

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ENVI R0NMEN AL S ENC I CI’ E

Vo .9. 12 No. 7 Jl 2 0 uy,0 8

遺傳穩(wěn)定型六六六、基對(duì)硫降解基因工程菌的構(gòu)甲磷建及特性研究 陸鵬洪源范洪青，新李順鵬，,蔣， ( .京農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)環(huán)境微生物工程重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室，京 209; .國科學(xué)院南京土壤研究所 1南南 105 2中土壤與農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，京南 200 ) 10 8

摘要：過轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)同源重組的方法，甲基對(duì)硫磷水解酶基因 m d導(dǎo)人到六六六降解菌 B CA的染色體上，建了能同通將 p H.構(gòu)時(shí)降解六六六和甲基對(duì)硫磷的基因工程菌 B CA m d.其生長(zhǎng)特性和降解特性的研究表明，程菌在 L H——p對(duì)工 B培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)特性與原始菌株沒有差別，長(zhǎng)至對(duì)數(shù)期 A生 值都可達(dá)到 25對(duì)六六六的降解特性和原始菌株相同，在 1內(nèi)將 5m/的 .;可 0h gL

六六六完全降解 . p m d基因在 B CA m d中穩(wěn)定表達(dá)，H—— p H ..p B C A m d可以降解多種有機(jī)磷類農(nóng)藥 .基因工程菌的構(gòu)建為六六該六和甲基對(duì)硫磷復(fù)合污染環(huán)境的生物修復(fù)奠定了基礎(chǔ) . 關(guān)鍵詞：六六；六甲基對(duì)硫磷；物降解；因工程菌生基 中圖分類號(hào)： 1 2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： 文章編號(hào)：2 03 0 ( 0 8 0—9 30 X 7 A 0 5 .3 1 2 0 ) 71 7 -4

Co s r to fa S a l n tc ly En i e e ir o g n s f r De r d ng H CH n t uc i n o t b e Ge e i a l g ne r d M c o r a im o g a i & M e hy r t i n a d Is Cha a t rsi s t lPa a h o n t r c e itc L eg, O G Y a— n, O G Qn,IN i L hnpn U Pn H N unf H N ig~ J G Xn,I u—eg a A S ( . y a oaoy f Mirbo gcl 1Ke L b rtr o coil ia o Enier g gne n Agiut

rl n i n n,Miir o g c l r,C l g o i S ine i rcl a u E vr met o ns t y f A r ut e ol e f Lf ce c,Naj g i u e e ni n

A r u ua U i r t, aj g 10 5 C i; .t eK yL b r o f ol n ut nb gi l r,nt t o S i S i c, hns g c l r n esy N n n 0 9, h a 2 S t e a oa r o i ad S s ial A r u ue Ist e f o c ne C ie i tl v i i 2 n a t y S a e ct i l e u e Acd m fSin e, aj g2 0 0 C ia a e yo e c s N ni 10 8, hn ) c n Ab ta tA G M ein td a HC A m d, aa l fsmu a eul erdn fmeh l aaho MP)a d HC a u c sfl sr c: E d s ae s B—— p cp be o i h no sy d ga ig o ty rtin( g p n H w ss cesul y c nt ce yrn o net no eh l aaho yrls e e( p noc rmoo f H—e aigs anB— i emii o su tdb ad m isro f m ty p rtinhdoaeg n m d)it ho smeo HC d g dn t i HC A wt t n— r i a a r r hh Tn t n p s n s se . e go h a d d ga ig c r ce itc fBHC— mpd wa o—r s o o y tm Th wt n e dn haa trsiso a r r A— s c mpae t h rgn lsri r d wih te o ia tan BHC—, n te rs t i A a d h eu l s o d ta hee wa o df r n e i hi t s e t A60 o h we h tt r sn ie e c n t s wo ap cs, 0 fBHC— m, n LB me i m o l e c 5 i o aih cp ro wh c s A— a i d u c ud r a h2. n lg rt mi e d, ih wa i te s me a h to h rgn tan BHC— . h a sta fte o i a sr i i l A BHC— mp h we

h a A— d s o d t e s me HCH— e a i g a it s BHC— a d c ud d g a e 5 mg L o d g d n bly a r i A n o e d / f l r —

HCH n 1 BHC A— d h we ih g n t a sa ii nd c ud d ga e ma y knd fo g n p o p o u p sii e Al te e rs l i 0 h.— mp s o d hg e ei tblt a o l e d n i s o r a o h s h r s e tcd s. l h s eut c y r s

id c td ta n iae h tBHC— mp wa rmiig GEM n boe dain o A— d sa po sn i ir me it fMP n o a d HCH o c n a n td e vr n n . c - o tmi ae n io me t

Ke r s HC meh lprtin MP; id ga ig g n t al e gnee co ra i ywo d: H; ty aaho ( ) bo e dn;e eil y nierd mirogns r c ms

六六六 ( C )一種脂溶性的有機(jī)氯農(nóng)藥 . H H是它主要有 a J 7艿4種立體異構(gòu)體，中 7異構(gòu)體具有、、、 3其殺蟲效力… .雖然從 2 O世紀(jì) 8 O年代以后，部分發(fā)大達(dá)國家和部分發(fā)展中國家已禁止使用六六六，由但 于其半衰期長(zhǎng)，目前仍是國內(nèi)外環(huán)境部門監(jiān)控的主

以在菌株中引入新的降解性狀，加降解菌的功能，增 降低生產(chǎn)和使用成本，污染環(huán)境生物修復(fù)提供優(yōu)為 良菌株 .研究將編碼甲基對(duì)硫磷水酶的基因本

m d,過基因工程的手段導(dǎo)入六六六高效降解 p通 菌 Shn o o a p B C A( H . ,建 1株具 p i m n ss . H . B CA)構(gòu) g

要對(duì)象 .有機(jī)磷農(nóng)藥是繼六六六以后的又一種主要 農(nóng)用殺蟲劑，甲基對(duì)硫磷是其主要品種之一 .它在為

有降解六六六及有機(jī)磷農(nóng)藥雙重功能的工程菌，，以期為六六六和有機(jī)磷農(nóng)藥復(fù)合污染環(huán)境的生物修復(fù) 奠定了基礎(chǔ) .

農(nóng)業(yè)生產(chǎn)提供高效殺蟲性能的同時(shí)也帶來了嚴(yán)重的負(fù)面影響 .留在土壤中的有機(jī)磷農(nóng)藥不僅會(huì)減弱殘 土壤的正常生產(chǎn)能力，會(huì)對(duì)人類的健康造成危還

害 .生物降解是一種環(huán)境友好型污染物去除方微式 .研人員已分離到六六六降解菌株科對(duì)硫磷降解菌株和甲基，且克隆了甲基對(duì)硫磷水解并

收稿日期：0 70—6 2 0—72;修訂日期：0 7 0— 1 2 0 .9 1基金項(xiàng)目：家自然科學(xué)基金項(xiàng)目 (000 3;蘇省科技廳項(xiàng)目國 340 1 )江 ( G 052 )江蘇省教育廳項(xiàng)目 (} D 62;國博士后 B 20 32; J{ o— )中 Z

酶基因 m d p,是還沒有分離到能同時(shí)降解甲但 基對(duì)硫磷和六六六的菌株 .過基因工程的手段可通

科學(xué)基金項(xiàng)目(o 5377;蘇省博士后科研計(jì)劃項(xiàng)目 2o07 4)江 作者簡(jiǎn)介：陸鵬 (96~)男，士研究生， 18,碩主要研究方向?yàn)榄h(huán)境微生物學(xué) . *通訊聯(lián)系人�！� alh nqn na@y ho cm.a E m i:o g igju ao .o c

  本文關(guān)鍵詞：遺傳穩(wěn)定型六六六、甲基對(duì)硫磷降解基因工程菌的構(gòu)建及特性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。