本文關(guān)鍵詞：超順磁氧化鐵納米顆粒標記人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶基因修飾神經(jīng)干細胞及體外MRI成像

  更多相關(guān)文章： 神經(jīng)干細胞 端粒 末端轉(zhuǎn)移酶 生物 基因修飾 組織工程 干細胞 培養(yǎng) 氧化鐵標記 超順磁性氧化鐵粒子 hTERT 基因修飾 磁共振成像

【摘要】：背景:細胞標記與體外MRI成像聯(lián)合,可無創(chuàng)性活體標記移植的神經(jīng)干細胞存在部位、存在方式及其一些生物學特性。目的:探討超順磁氧化鐵納米顆粒(SPIO)標記對人端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶(hT ERT)基因修飾神經(jīng)干細胞生物學特性的影響及標記后MR成像效果。方法:體外培養(yǎng)大鼠骨髓來源的神經(jīng)干細胞,將其分為正常神經(jīng)干細胞組、SPIO標記神經(jīng)干細胞組、SPIO標記空載病毒組及SPIO標記hT ERT轉(zhuǎn)染組。采用電穿孔法將pcD NA3-hT ERT重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至神經(jīng)干細胞,并進行SPIO標記,當神經(jīng)干細胞標記成功后即行4.7T MR掃描,流式細胞儀、MTT法檢測細胞周期、細胞增殖能力,RT-PCR和Western blot檢測hT ERT基因和蛋白的表達。結(jié)果與結(jié)論:(1)普魯士藍染色顯示SPIO對神經(jīng)干細胞的標記率為97%;(2)MRI成像顯示,與正常神經(jīng)干細胞組相比,SPIO標記神經(jīng)干細胞組的T2及T2*弛豫時間均顯著下降,相應的弛豫率則顯著升高(P0.01);(3)與正常神經(jīng)干細胞比較,SPIO標記的3組神經(jīng)干細胞增殖能力相比明顯增強,處于G0-G1及S期的比例明顯增多;(4)與SPIO標記神經(jīng)干細胞組、SPIO標記空載病毒組比較,SPIO標記hT ERT轉(zhuǎn)染組hT ERT mR NA及蛋白的表達均明顯增強;(5)結(jié)果表明,在體外超順磁性氧化鐵能夠高效標記神經(jīng)干細胞,經(jīng)hT ERT基因修飾后能夠穩(wěn)定表達h TERT基因,細胞增殖能力顯著增強,4.7T MR儀能夠?qū)擞浐蟮募毎行нM行體外成像。
【作者單位】： 新鄉(xiāng)醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院放射科;
【關(guān)鍵詞】： 神經(jīng)干細胞 端粒 末端轉(zhuǎn)移酶 生物 基因修飾 組織工程 干細胞 培養(yǎng) 氧化鐵標記 超順磁性氧化鐵粒子 hTERT 基因修飾 磁共振成像
【分類號】：R329.2;R445.2
【正文快照】： 0引言Introduction 一直以來神經(jīng)細胞、心肌細胞及骨骼肌細胞被稱為不可再生的細胞,一旦損傷不能通過細胞再生來達到修復目的。隨著干細胞研究的逐漸深入,發(fā)現(xiàn)神經(jīng)干細胞可以在特定條件下分化成為神經(jīng)元起到神經(jīng)修復作用,這為神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療提供了新的思路[1-3]。目前動

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