本文關(guān)鍵詞：genP基因在依紐小單孢菌中表達(dá)的分析

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【摘要】：慶大霉素生物合成過程中的genP基因和西索米星生物合成過程中的sisI基因?qū)偻ぎ愒疵富?均能催化絳紅糖胺3′,4′-雙脫羥基反應(yīng)。本研究借助組合生物合成,探索絳紅小單孢菌中的genP基因能否在依紐小單孢菌中表達(dá)。首先構(gòu)建genP基因替換sisI基因的同源重組質(zhì)粒pKPI4,并經(jīng)接合轉(zhuǎn)移將其導(dǎo)入依紐小單孢菌TS388中,最后再通過影印篩選及PCR鑒定獲得genP基因替換sisI基因的工程菌PTI886。將野生型菌株TS388、sisI基因缺失突變株TI1102(TS388△sisI)及工程菌PTI886在同等條件下進(jìn)行發(fā)酵,提取其代謝產(chǎn)物并經(jīng)薄層層析及質(zhì)譜分析。結(jié)果表明,突變株TI1102不能合成西索米星,而工程菌PTI886仍能繼續(xù)合成西索米星,且代謝產(chǎn)物組分與野生型菌株TS388相比無明顯變化,說明genP基因能在依紐小單孢菌中表達(dá)。本研究揭示了同工異源酶基因異源表達(dá)的可行性,可為今后不同微生物異源基因組合的研究提供借鑒。
【作者單位】： 福州大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 組合生物合成 genP基因 sisI基因 異源表達(dá) ' '-雙脫羥基
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(31070093)
【分類號】：Q78
【正文快照】： 氨基糖苷類抗生素是良好的抗菌藥物,而且具有潛在的治療人體免疫缺陷[1]和消除抗藥性質(zhì)粒功能[2_3]。氨基糖苷類抗生素的抗菌機(jī)制是通過與細(xì)菌核糖體16S rRNA上的A位點結(jié)合,使核糖體和mRNA無法正常結(jié)合,導(dǎo)致細(xì)菌蛋白質(zhì)合成過程受阻,從而殺死或抑制病原菌[4]。根據(jù)該類抗生素的

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