本文關鍵詞：斑節(jié)對蝦谷氨酸脫氫酶基因克隆及氨氮脅迫對其時空表達的影響

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【摘要】：采用cDNA末端快速擴增技術(rapid amplification of cDNA ends,RACE)獲得了斑節(jié)對蝦(Penaeus monodon)谷氨酸脫氫酶基因(PmGDH)的cDNA序列。該序列全長2386 bp,開放閱讀框(ORF)為1677 bp,3'非編碼區(qū)(UTR)為688 bp,包括含有27個堿基的poly(A)尾,5'非編碼區(qū)(UTR)為21 bp。ORF可編碼558個氨基酸,預測分子量為61.837 k D,理論等電點為6.57。序列含有ELFV dehydrog N與NAD bind 1 Glu DH兩個保守結構域,37個磷酸化位點,3個糖基化位點。通過同源性、相似性以及系統(tǒng)進化樹分析,斑節(jié)對蝦的GDH基因與凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)GDH基因的同源性和相似性最高,并與其聚為一支。采用熒光定量的方法研究了PmGDH基因在斑節(jié)對蝦不同組織、氨氮脅迫過程中差異表達情況。結果表明,PmGDH的m RNA在各組織中都有表達,其中,在肌肉組織中表達量最高,其次為眼柄神經(jīng),在血淋巴與腸組織中表達量最低。96 h氨氮脅迫后,熒光定量PCR分析結果表明PmGDH在肝胰腺和鰓組織中的表達與對照組相比都具有顯著差異(P0.05),都具有不同程度的表達上調。表明PmGDH在氨氮代謝方面具有重要的作用,參與了斑節(jié)對蝦機體的急性氨氮脅迫應答反應。
【作者單位】： 中國水產(chǎn)科學研究院南海水產(chǎn)研究所農業(yè)部南海漁業(yè)資源開發(fā)利用重點實驗室;上海海洋大學水產(chǎn)與生命學院;
【關鍵詞】： 斑節(jié)對蝦 谷氨酸脫氫酶 氨氮脅迫 基因克隆 組織表達
【分類號】：S917
【正文快照】： 谷氨酸脫氫酶(Glutamate dehydrogenase,EC1.4.1.2,簡稱GDH)作為一種線粒體酶廣泛存在于植物、動物和微生物中,是氨基酸分解代謝的關鍵性酶,其在動物肝、腎和腦等組織中廣泛分布,活性很強,可催化谷氨酸發(fā)生氧化脫氨基反應,在甲殼動物氨氮代謝過程中發(fā)揮非常重要的作用[1-2]。

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