本文關(guān)鍵詞：斑節(jié)對(duì)蝦谷氨酸脫氫酶基因克隆及氨氮脅迫對(duì)其時(shí)空表達(dá)的影響

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【摘要】：采用cDNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)(rapid amplification of cDNA ends,RACE)獲得了斑節(jié)對(duì)蝦(Penaeus monodon)谷氨酸脫氫酶基因(PmGDH)的cDNA序列。該序列全長(zhǎng)2386 bp,開(kāi)放閱讀框(ORF)為1677 bp,3'非編碼區(qū)(UTR)為688 bp,包括含有27個(gè)堿基的poly(A)尾,5'非編碼區(qū)(UTR)為21 bp。ORF可編碼558個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)分子量為61.837 k D,理論等電點(diǎn)為6.57。序列含有ELFV dehydrog N與NAD bind 1 Glu DH兩個(gè)保守結(jié)構(gòu)域,37個(gè)磷酸化位點(diǎn),3個(gè)糖基化位點(diǎn)。通過(guò)同源性、相似性以及系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析,斑節(jié)對(duì)蝦的GDH基因與凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeus vannamei)GDH基因的同源性和相似性最高,并與其聚為一支。采用熒光定量的方法研究了PmGDH基因在斑節(jié)對(duì)蝦不同組織、氨氮脅迫過(guò)程中差異表達(dá)情況。結(jié)果表明,PmGDH的m RNA在各組織中都有表達(dá),其中,在肌肉組織中表達(dá)量最高,其次為眼柄神經(jīng),在血淋巴與腸組織中表達(dá)量最低。96 h氨氮脅迫后,熒光定量PCR分析結(jié)果表明PmGDH在肝胰腺和鰓組織中的表達(dá)與對(duì)照組相比都具有顯著差異(P0.05),都具有不同程度的表達(dá)上調(diào)。表明PmGDH在氨氮代謝方面具有重要的作用,參與了斑節(jié)對(duì)蝦機(jī)體的急性氨氮脅迫應(yīng)答反應(yīng)。
【作者單位】： 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所農(nóng)業(yè)部南海漁業(yè)資源開(kāi)發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 斑節(jié)對(duì)蝦 谷氨酸脫氫酶 氨氮脅迫 基因克隆 組織表達(dá)
【分類(lèi)號(hào)】：S917
【正文快照】： 谷氨酸脫氫酶(Glutamate dehydrogenase,EC1.4.1.2,簡(jiǎn)稱(chēng)GDH)作為一種線粒體酶廣泛存在于植物、動(dòng)物和微生物中,是氨基酸分解代謝的關(guān)鍵性酶,其在動(dòng)物肝、腎和腦等組織中廣泛分布,活性很強(qiáng),可催化谷氨酸發(fā)生氧化脫氨基反應(yīng),在甲殼動(dòng)物氨氮代謝過(guò)程中發(fā)揮非常重要的作用[1-2]。

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本文編號(hào)：609865