棉花脂肪酸合成酶基因GhKAR和GhENR表達(dá)載體構(gòu)建及其功能初探
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【摘要】:酮脂酰ACP還原酶(β-ketoacyl-(ACP)reductase,KAR)和烯脂酰ACP還原酶(β-enoyl-(ACP)reductase,ENR)是脂肪酸合成過程中2個關(guān)鍵的還原酶,主要負(fù)責(zé)脂肪酸碳鏈的延伸。為明確棉花同源基因的功能,克隆了陸地棉Gh KAR和Gh ENR基因,并構(gòu)建表達(dá)載體;應(yīng)用花粉管通道法轉(zhuǎn)化棉花,經(jīng)過PCR檢測和Southern雜交,篩選出陽性單拷貝植株,分析其后代株系中目的基因?qū)τ头趾恳约翱购缘挠绊。通過對轉(zhuǎn)基因T4株系含油量的測定,發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因株系種子的含油量比野生型對照提高10.2%~14.1%,與對照差異極顯著。通過氣相色譜法分析轉(zhuǎn)基因株系種子的脂肪酸成分,發(fā)現(xiàn)不飽和脂肪酸含量比野生型對照增加4.04%~6.02%。測定4℃低溫脅迫下各個轉(zhuǎn)基因株系不同時間生理指標(biāo)的變化,結(jié)果表明:轉(zhuǎn)基因株系的相對電導(dǎo)率和脯氨酸含量積累明顯高于對照,而丙二醛含量低于對照,在不同脅迫時間與對照表現(xiàn)出顯著或極顯著差異,過表達(dá)的轉(zhuǎn)基因株系的抗寒性有所提高。
【作者單位】: 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)棉花遺傳育種與基因組研究實驗室;新疆農(nóng)墾科學(xué)院棉花研究所/農(nóng)業(yè)部西北內(nèi)陸區(qū)棉花生物學(xué)與遺傳育種重點(diǎn)實驗室;湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物研究所;
【關(guān)鍵詞】: 陸地棉 脂肪酸合成 含油量 抗寒性
【基金】:國家自然科學(xué)基金——棉花脂肪酸關(guān)鍵基因的表達(dá)特征研究及功能分析(31360349) 國家科技重大專項(2014ZX08005002-004) 新疆農(nóng)墾科學(xué)院科技引導(dǎo)計劃(YYD2010-5)
【分類號】:S562
【正文快照】: 棉籽仁含油(脂肪酸)量(質(zhì)量分?jǐn)?shù),下同)達(dá)25%~40%[1]。棉籽油除可用作生活食用油、化學(xué)工業(yè)原料外[2-3],還是生產(chǎn)生物柴油的理想原料[4]。此外,脂肪酸不僅能為植物儲存能量、為種子萌發(fā)提供所需的能量,而且也是某些信號分子的前體,在損傷防御和耐寒性等方面有重要作用[5],如膜
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,本文編號:569976
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