本文關(guān)鍵詞：馬爾他布氏桿菌divK基因的克隆與原核表達(dá)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：為了克隆馬爾他布氏桿菌M 5-90株divK基因并對(duì)其進(jìn)行原核表達(dá),根據(jù)GenBank中M5-90株divK基因序列,設(shè)計(jì)了1對(duì)引物;以此菌株的基因組為模板,用設(shè)計(jì)的引物擴(kuò)增出了372 bp的基因片段。用凝膠回收純化目的基因片段,并將其與pMD 20-T載體連接,轉(zhuǎn)化大腸桿菌(E.coli)DH 5α后測(cè)序;測(cè)序正確后將此基因片段克隆到pET-28a(+),構(gòu)建重組質(zhì)粒pET28a(+)-divK;然后,把構(gòu)建好的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化入E.coli BL 21(DE3)。1 mmol/L IPTG誘導(dǎo)后,SDS-PAGE和Western-blot分析的結(jié)果表明,誘導(dǎo)表達(dá)的蛋白與目的蛋白的大小一致,說明本研究成功構(gòu)建了pET28a(+)-divk原核表達(dá)載體,并在E.coli BL21中成功表達(dá)了divK基因。
【作者單位】： 海南大學(xué)農(nóng)學(xué)院海南省熱帶動(dòng)物繁育與疫病研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室海口市動(dòng)物基因工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;海南省畜牧技術(shù)推廣站;
【關(guān)鍵詞】： 馬爾他布氏桿菌 divK基因 克隆 原核表達(dá)
【分類號(hào)】：S852.614
【正文快照】： 布氏桿菌病是由布氏桿菌(Brucella)引起的一種人獸共患的細(xì)菌性傳染病[1-3]。馬爾他布氏桿菌病不僅給畜牧業(yè)生產(chǎn)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失,而且引起嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題,已受到越來越多的關(guān)注。馬爾他布氏桿菌(B.M elitensis)是目前導(dǎo)致我國(guó)布氏桿菌病流行的主要菌株之一[4-5]。Div K-c

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4 鐘樹懷;豬囊尾蚴膜聯(lián)蛋白的原核表達(dá)及其免疫反應(yīng)性分析[D];貴陽醫(yī)學(xué)院;2015年

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7 達(dá)小強(qiáng);牦牛轉(zhuǎn)鐵蛋白基因克隆與原核表達(dá)[D];西北民族大學(xué);2015年

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  本文關(guān)鍵詞：馬爾他布氏桿菌divK基因的克隆與原核表達(dá)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：471178