本文關鍵詞：馬爾他布氏桿菌divK基因的克隆與原核表達，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：為了克隆馬爾他布氏桿菌M 5-90株divK基因并對其進行原核表達,根據(jù)GenBank中M5-90株divK基因序列,設計了1對引物;以此菌株的基因組為模板,用設計的引物擴增出了372 bp的基因片段。用凝膠回收純化目的基因片段,并將其與pMD 20-T載體連接,轉化大腸桿菌(E.coli)DH 5α后測序;測序正確后將此基因片段克隆到pET-28a(+),構建重組質粒pET28a(+)-divK;然后,把構建好的重組質粒轉化入E.coli BL 21(DE3)。1 mmol/L IPTG誘導后,SDS-PAGE和Western-blot分析的結果表明,誘導表達的蛋白與目的蛋白的大小一致,說明本研究成功構建了pET28a(+)-divk原核表達載體,并在E.coli BL21中成功表達了divK基因。
【作者單位】： 海南大學農學院海南省熱帶動物繁育與疫病研究重點實驗室�？谑袆游锘蚬こ讨攸c實驗室;海南省畜牧技術推廣站;
【關鍵詞】： 馬爾他布氏桿菌 divK基因 克隆 原核表達
【分類號】：S852.614
【正文快照】： 布氏桿菌病是由布氏桿菌(Brucella)引起的一種人獸共患的細菌性傳染病[1-3]。馬爾他布氏桿菌病不僅給畜牧業(yè)生產(chǎn)造成巨大經(jīng)濟損失,而且引起嚴重的公共衛(wèi)生問題,已受到越來越多的關注。馬爾他布氏桿菌(B.M elitensis)是目前導致我國布氏桿菌病流行的主要菌株之一[4-5]。Div K-c

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