本文關(guān)鍵詞：滇龍膽GrCMS基因的克隆與表達(dá)分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：2-C-甲基-D-赤蘚醇4-磷酸胞苷酰轉(zhuǎn)移酶是赤蘚糖磷酸酯(MEP)途徑中的第三個(gè)催化酶。以滇龍膽轉(zhuǎn)錄組為基礎(chǔ),采用RT-PCR技術(shù)從滇龍膽幼葉克隆2-C-甲基-D-赤蘚醇4-磷酸胞苷酰轉(zhuǎn)移酶基因GrCMS,并進(jìn)行原核表達(dá)和組織特異性表達(dá)分析。序列分析顯示,GrCMS基因(登錄號(hào)KJ917164)開放閱讀框(ORF)長(zhǎng)933 bp,編碼310氨基酸,推測(cè)分子量為34.23 kD,等電點(diǎn)為7.68。蛋白質(zhì)序列分析顯示,GrCMS無信號(hào)肽,為親水穩(wěn)定蛋白,主要由α-螺旋和無規(guī)則卷曲構(gòu)成,可能定位葉綠體;具有CMS保守結(jié)構(gòu)域。進(jìn)化分析結(jié)果表明,GrCMS蛋白與長(zhǎng)春花CrCMS蛋白親緣關(guān)系最近。原核表達(dá)結(jié)果表明,GrCMS與預(yù)期蛋白大小一致。定量PCR結(jié)果表明,GrCMS基因主要在葉中表達(dá)。結(jié)果為進(jìn)一步研究該基因功能和龍膽苦苷生物合成途徑奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 玉溪師范學(xué)院資源環(huán)境學(xué)院;云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院藥用植物研究所;
【關(guān)鍵詞】： 滇龍膽 -C-甲基-D-赤蘚醇-磷酸胞苷酰轉(zhuǎn)移酶 基因克隆 表達(dá)分析
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81260608) 云南省教育廳重點(diǎn)項(xiàng)目(2015Z171) 科技部“十二五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目
【分類號(hào)】：S567.239;Q943.2
【正文快照】： 滇龍膽(Gentiana rigescens)為常用大宗藥材,是200多種中藥的主要成分[1]。近年來,龍膽市場(chǎng)需求量年遞增約10%,國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)對(duì)龍膽的需求量高達(dá)3 000~4 000噸,導(dǎo)致野生滇龍膽遭到人 為大肆破壞[1]。2013年7月,云南省啟動(dòng)了龍膽草航天育種工程,其目標(biāo)主要是提高主要藥效成分龍膽

【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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