本文關(guān)鍵詞：蘋果MdJAZ1基因表達(dá)及蛋白互作分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：【目的】克隆蘋果茉莉酸信號途徑阻遏因子基因MdJAZ1,并對其表達(dá)及蛋白互作進(jìn)行分析,為進(jìn)一步研究MdJAZ1的功能奠定基礎(chǔ)。【方法】以TIFY及Jas功能域?yàn)樘结?在蘋果基因組中進(jìn)行比對,獲得多個(gè)同源基因,對其中的一個(gè)基因設(shè)計(jì)引物進(jìn)行克隆;利用DNAMan軟件對該基因編碼蛋白的分子量、等電點(diǎn)進(jìn)行預(yù)測;利用SMART在線分析軟件對該蛋白的功能域進(jìn)行分析;利用MEGA5.0對該蛋白與擬南芥JAZ家族蛋白構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹;利用熒光定量PCR分析該基因在蘋果不同組織器官、茉莉酸甲酯及創(chuàng)傷處理下的表達(dá)情況;利用Plant CARE在線軟件分析該基因啟動(dòng)子區(qū)域的順式作用元件;利用酵母雙雜交系統(tǒng)檢測MdJAZ1蛋白的二聚化及其與擬南芥AtCOI1蛋白的互作關(guān)系�！窘Y(jié)果】MdJAZ1開放閱讀框?yàn)? 149 bp,編碼382個(gè)氨基酸殘基,其蛋白的分子量為40.536kDa,等電點(diǎn)9。氨基酸序列分析顯示,該蛋白包含保守的TIFY及Jas結(jié)構(gòu)域;系統(tǒng)發(fā)育樹分析顯示,MdJAZ1蛋白與擬南芥JAZ家族AtJAZ3、AtJAZ4親緣關(guān)系最近;qPCR結(jié)果顯示,MdJAZ1在蘋果的根、莖、葉、花及果實(shí)等組織中都有表達(dá),但表達(dá)水平存在明顯差異,其中根中的表達(dá)量最高,果實(shí)中的表達(dá)量最低;該基因還能被茉莉酸甲酯及創(chuàng)傷處理誘導(dǎo)表達(dá),均在1 h內(nèi)達(dá)到最高表達(dá)水平;啟動(dòng)子分析顯示,MdJAZ1啟動(dòng)子中包含多個(gè)ABA、乙烯、抗病及逆境脅迫等響應(yīng)元件,此外,還包含多個(gè)MYB結(jié)合位點(diǎn);酵母雙雜交結(jié)果顯示,MdJAZ1蛋白能與其自身相互作用形成同源二聚體,還可與擬南芥中同源性較近的AtJAZ3、AtJAZ4蛋白相互作用形成異源二聚體,并且在冠菌素存在時(shí),MdJAZ1蛋白可與擬南芥F-box蛋白AtCOI1相互作用。【結(jié)論】MdJAZ1受茉莉酸甲酯及創(chuàng)傷誘導(dǎo)表達(dá),其蛋白能形成同源及異源二聚體,且在冠菌素存在時(shí)可與AtCOI1互作。
【作者單位】： 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹研究所/農(nóng)業(yè)部園藝作物種質(zhì)資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 蘋果 茉莉酸 MdJAZ 表達(dá) 蛋白互作
【基金】：國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)(CARS-28) 遼寧省博士啟動(dòng)基金(201501031) 中央級公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)(0032015019)
【分類號】：S661.1
【正文快照】： 不敏感等[22];大豆中的研究顯示,Gs JAZ2過量表達(dá)0引言提高植株對鹽堿的抗性[23]。JAZ蛋白能夠與轉(zhuǎn)錄因子【研究意義】茉莉酸(jasmonic acid,JA)是植相互作用,進(jìn)而抑制轉(zhuǎn)錄因子的轉(zhuǎn)錄活性。MYC是茉物重要的信號分子之一,在植物生長發(fā)育、病菌響應(yīng)莉酸信號途徑下游重要的轉(zhuǎn)錄因

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本文編號：453493