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重組des-pGlu1-Brazzein基因植物表達載體的構(gòu)建及對人參果的遺傳轉(zhuǎn)化

發(fā)布時間:2017-06-14 12:02

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【摘要】:本研究通過對茄科植物的E8基因的非編碼區(qū)DNA序列進行親緣關(guān)系及功能元件保守性分析,發(fā)現(xiàn)E8基因的非編碼區(qū)包含ERE,茉莉酸和低溫干旱應(yīng)答等基序并存在較高的保守性,表明利用果實特異性E8啟動子改善同屬茄科茄屬的人參果果實風味更具特異性;利用密碼子偏愛性優(yōu)化設(shè)計甜蛋白Brazzein,采用亞克隆技術(shù)成功獲得甜蛋白des-pGlu1-Brazzein基因和E8啟動子基因,經(jīng)Blast對比均與GenBank中已報道的序列高度同源,并利用2KGQ模型分析des-pGlu1-Brazzein基因的空間結(jié)構(gòu)特性;以中間載體pHANNIBAL及植物表達載體pCEPSP為基礎(chǔ),分別構(gòu)建由E8啟動子及35S啟動子驅(qū)動的兼具重組甜蛋白及除草劑抗性的植物表達載體,并通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法進行人參果的遺傳轉(zhuǎn)化,獲得轉(zhuǎn)化再生植株54株,經(jīng)檢測從中篩選出15株陽性植株,初步確定已經(jīng)完成目的基因整合到人參果基因組中。
【作者單位】: 甘肅省作物遺傳改良與種質(zhì)創(chuàng)新重點實驗室;甘肅省干旱生境作物學重點實驗室;甘肅農(nóng)業(yè)大學生命科學技術(shù)學院;甘肅農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學院;
【關(guān)鍵詞】人參果 des-pGlu-Brazzein E啟動子 CaMV S啟動子 植物表達載體 遺傳轉(zhuǎn)化
【基金】:甘肅省農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究與開發(fā)項目(GNSW-2012-22)資助
【分類號】:Q943.2;S668.9
【正文快照】:

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