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黃瓜谷氧還蛋白CsGRX1基因?qū)S瓜遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立

發(fā)布時(shí)間:2017-06-02 17:12

  本文關(guān)鍵詞:黃瓜谷氧還蛋白CsGRX1基因?qū)S瓜遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:黃瓜(Cucumis sativus L.)作為我國(guó)的主要蔬菜作物之一,在世界蔬菜栽培面積中居于第4位。黃瓜種內(nèi)資源非常有限,利用基因工程培育新品種成為提高黃瓜產(chǎn)量和品質(zhì)的重要手段。本試驗(yàn)利用黃瓜谷氧還蛋白CsGRX1基因?qū)?4-1進(jìn)行了遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立及通過(guò)胚狀體途徑遺傳轉(zhuǎn)化的研究。研究結(jié)果如下:1.以子葉節(jié)為外植體通過(guò)器官再生途徑建立了黃瓜的遺傳轉(zhuǎn)化體系。Basta的半致死濃度為0.5 mg/L、預(yù)培養(yǎng)時(shí)間2 d、農(nóng)桿菌OD600為0.5、侵染時(shí)間15 min、共培養(yǎng)時(shí)間2 d時(shí)抗性芽數(shù)量較高;加入100μmol/L乙酰丁香酮轉(zhuǎn)化效果較好。2.以14-1子葉節(jié)為外植體建立了通過(guò)胚狀體途徑的再生體系。最佳的愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基為添加1.0mg/L 2,4-D的MS培養(yǎng)基,最佳的分化培養(yǎng)基為激素組合是0.05 mg/L2,4-D+1.0 mg/L KT+0.1 mg/L IAA的MS培養(yǎng)基。利用14-1的胚狀體進(jìn)行CsGRX1的遺傳轉(zhuǎn)化,并得到幼苗。
【關(guān)鍵詞】:黃瓜 遺傳轉(zhuǎn)化 胚狀體再生 CsGRX1
【學(xué)位授予單位】:西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:S642.2
【目錄】:
  • 摘要6-7
  • ABSTRACT7-10
  • 第一章 文獻(xiàn)綜述10-18
  • 1.1 黃瓜離體培養(yǎng)研究進(jìn)展10-13
  • 1.1.1 基因型10-11
  • 1.1.2 外源激素11-12
  • 1.1.3 外植體12
  • 1.1.4 苗齡12-13
  • 1.1.5 碳源13
  • 1.1.6 硝酸銀13
  • 1.2 黃瓜遺傳轉(zhuǎn)化研究進(jìn)展13-17
  • 1.2.1 遺傳轉(zhuǎn)化的方法14-15
  • 1.2.2 黃瓜遺傳轉(zhuǎn)化的影響因素15-17
  • 1.3 谷氧還蛋白簡(jiǎn)介17
  • 1.4 研究目的和意義17-18
  • 第二章 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的黃瓜谷氧還蛋白基因CsGRX1對(duì)黃瓜遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立18-26
  • 2.1 試驗(yàn)材料和方法18-19
  • 2.1.1 試驗(yàn)材料和培養(yǎng)基種類(lèi)18
  • 2.1.2 試驗(yàn)方法18-19
  • 2.2 結(jié)果與分析19-23
  • 2.2.1 除草劑草丁膦(Basta)敏感性測(cè)試19-21
  • 2.2.2 預(yù)培養(yǎng)時(shí)間對(duì)黃瓜遺傳轉(zhuǎn)化的影響21
  • 2.2.3 農(nóng)桿菌濃度對(duì)黃瓜遺傳轉(zhuǎn)化的影響21
  • 2.2.4 侵染時(shí)間對(duì)黃瓜遺傳轉(zhuǎn)化的影響21-22
  • 2.2.5 乙酰預(yù)丁香酮處理濃度對(duì)黃瓜遺傳轉(zhuǎn)化的影響22
  • 2.2.6 共培養(yǎng)時(shí)間對(duì)黃瓜遺傳轉(zhuǎn)化的影響22-23
  • 2.2.7 14-1 遺傳轉(zhuǎn)化過(guò)程23
  • 2.3 討論23-24
  • 2.3.1 預(yù)培養(yǎng)對(duì)轉(zhuǎn)化的影響23-24
  • 2.3.2 共培養(yǎng)對(duì)轉(zhuǎn)化的影響24
  • 2.3.3 乙酰丁香酮對(duì)轉(zhuǎn)化的影響24
  • 2.3.4 農(nóng)桿菌濃度和侵染時(shí)間對(duì)遺傳轉(zhuǎn)化的影響24
  • 2.4 結(jié)論24-26
  • 2.4.1 除草劑草丁膦(Basta)敏感性測(cè)試24-25
  • 2.4.2 預(yù)培養(yǎng)時(shí)間對(duì)黃瓜遺傳轉(zhuǎn)化的影響25
  • 2.4.3 農(nóng)桿菌濃度對(duì)黃瓜遺傳轉(zhuǎn)化的影響25
  • 2.4.4 侵染時(shí)間對(duì)黃瓜遺傳轉(zhuǎn)化的影響25
  • 2.4.5 乙酰丁香酮預(yù)處理濃度對(duì)黃瓜遺傳轉(zhuǎn)化的影響25
  • 2.4.6 共培養(yǎng)時(shí)間對(duì)黃瓜遺傳轉(zhuǎn)化的影響25-26
  • 第三章 黃瓜胚狀體再生體系的建立及CsGRX1對(duì)胚狀體的遺傳轉(zhuǎn)化26-34
  • 3.1 材料與方法26-27
  • 3.1.1 試驗(yàn)材料26
  • 3.1.2 試驗(yàn)方法26-27
  • 3.1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)27
  • 3.2 結(jié)果與分析27-32
  • 3.2.1 不同基因型在愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基上的誘導(dǎo)率27-28
  • 3.2.2 14-1 在愈傷誘導(dǎo)培養(yǎng)基胚性愈傷的誘導(dǎo)28
  • 3.2.3 14-1 在分化培養(yǎng)基的誘導(dǎo)28-30
  • 3.2.4 14-1 體細(xì)胞胚的形態(tài)觀察30-31
  • 3.2.5 胚狀體發(fā)育形成植株31
  • 3.2.6 胚狀體遺傳轉(zhuǎn)化得到幼苗31-32
  • 3.3 討論32-33
  • 3.4 結(jié)論33-34
  • 第四章 結(jié)論34-35
  • 參考文獻(xiàn)35-38
  • 致謝38-39
  • 作者簡(jiǎn)介39

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6 繆e,

本文編號(hào):415978


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