目的探討OIP5-AS1基因?qū)Ψ切〖毎伟?non-small cell lung cancer, NSCLC)細胞化學敏感性的作用及分子機制。方法采用CCK-8法檢測正常肺細胞系BEAS-2B、肺癌細胞系A549和順鉑耐藥肺癌細胞A549/DDP的半抑制濃度(IC50)值。應用RT-qPCR檢測OIP5-AS1、miR-7-5p和PARP1的表達水平。生物信息學檢測OIP5-AS1、miR-7-5p和PARP1的靶向關(guān)系,用熒光素實驗進一步驗證。Western blot法檢測相關(guān)蛋白的表達;流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡情況;克隆形成檢測細胞生長情況。結(jié)果 A549/DDP細胞中IC50值最高,且OIP5-AS1高表達,miR-7-5p低表達。miR-7-5p是OIP5-AS1的靶向調(diào)節(jié)基因之一,且為負調(diào)控關(guān)系。敲除OIP5-AS1抑制A549/DDP細胞的生長并增強化學敏感性,促進A549/DDP細胞凋亡。敲除OIP5-AS1下調(diào)PARP1可以增強A549/DDP細胞的化學敏感性,抑制NSCLC的生長和凋亡。結(jié)論 OIP5-AS1通過上調(diào)miR-7-5p或下調(diào)PARP1,增強A549/DD...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 細胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染
        1.2.2 CCK-8
        1.2.3 RT-qPCR檢測OIP5-AS1、miR-7-5p和PARP1的表達水平
        1.2.4 雙熒光素酶報告分析
        1.2.5 克隆形成檢測
        1.2.6 Western blot法
        1.2.7 流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡情況
    1.3 統(tǒng)計學分析
2 結(jié)果
    2.1 A549/DDP細胞中OIP5-AS1、miR-7-5p、PARP1的表達
    2.2 OIP5-AS1和miR-7-5p的靶向關(guān)系
    2.3 敲除OIP5-AS1對A549/DDP細胞IC50值的影響
    2.4 敲除OIP5-AS1對A549/DDP細胞生長的影響
    2.5 敲除OIP5-AS1后Ki-67、PCNA、MDR1蛋白表達
    2.6 敲除OIP5-AS1對A549/DDP細胞凋亡的影響
    2.7 敲除OIP5-AS1后Bax、BCL-2蛋白表達
    2.8 敲除OIP5-AS1調(diào)節(jié)miR-7-5p/PARP1軸增強A549/DDP細胞的化學敏感性
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