[目的]本文旨在研究BrABF3基因在不結(jié)球白菜開花時(shí)間調(diào)控中的功能。[方法]以不結(jié)球白菜‘蘇州青’為材料,通過同源克隆獲得BrABF3基因全長序列,再與其他物種中的同源序列進(jìn)行進(jìn)化樹分析;利用注射法將農(nóng)桿菌導(dǎo)入煙草葉片研究BrABF3基因的亞細(xì)胞定位;利用PlantCARE在線軟件分析啟動(dòng)子motif元件;采用熒光定量PCR(RT-qPCR)技術(shù)分析BrABF3基因在早花品種‘蘇州青’和晚花‘五月慢’品種不同生長期的表達(dá)情況。[結(jié)果]BrABF3基因含有1 242 bp開放閱讀框,編碼413個(gè)氨基酸,其蛋白定位于細(xì)胞核。在進(jìn)化過程中BrABF3的氨基酸序列與甘藍(lán)型油菜親緣關(guān)系最近。BrABF3啟動(dòng)子序列中含有大量的motif元件,如光響應(yīng)元件、激素響應(yīng)元件和脅迫響應(yīng)元件等。RT-qPCR結(jié)果表明,開花前BrABF3基因在晚花品種‘五月慢’中的表達(dá)顯著高于早花品種‘蘇州青’。[結(jié)論]本試驗(yàn)克隆并獲得BrABF3基因,其蛋白定位于細(xì)胞核,而且在晚花品種中高表達(dá),推測該基因可能參與調(diào)控不結(jié)球白菜的開花時(shí)間。

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 不結(jié)球白菜BrABF3基因的克隆
    1.2 不結(jié)球白菜BrABF3基因的氨基酸和系統(tǒng)進(jìn)化樹分析
    1.3 gateway技術(shù)構(gòu)建載體
        1.3.1 BrABF3基因片段的PCR擴(kuò)增
        1.3.2 BP重組反應(yīng)
        1.3.3 LR重組反應(yīng)
    1.4 BrABF3亞細(xì)胞定位分析
    1.5 BrABF3啟動(dòng)子序列分析
    1.6 開花時(shí)間統(tǒng)計(jì)分析
    1.7 BrABF3基因的RT-qPCR分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 不結(jié)球白菜BrABF3基因的克隆
    2.2 不結(jié)球白菜BrABF3基因的氨基酸和系統(tǒng)進(jìn)化樹分析
    2.3 不結(jié)球白菜BrABF3的亞細(xì)胞定位分析
    2.4 BrABF3啟動(dòng)子序列分析
    2.5 不結(jié)球白菜開花時(shí)間統(tǒng)計(jì)分析
    2.6 不結(jié)球白菜BrABF3基因的RT-qPCR分析
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