為研究MC1R在兩棲動(dòng)物體色形成中的作用,試驗(yàn)結(jié)合轉(zhuǎn)錄組分析和電子克隆技術(shù)得到大鯢(Andrias davidianus)MC1R部分cDNA序列并進(jìn)行了生物信息學(xué)分析,采用實(shí)時(shí)熒光定量法檢測(cè)了大鯢MC1R基因在皮膚、肝臟等10個(gè)組織中的表達(dá)情況及4種不同體色大鯢皮膚組織中MC1R基因的表達(dá)量。結(jié)果表明:得到大鯢MC1R部分cDNA長(zhǎng)為295 bp,位于該基因編碼區(qū)。其與人、小鼠等哺乳動(dòng)物和鳥類MC1R核苷酸同源性在57%～83%。大鯢MC1R基因與粗皮漬螈的親緣關(guān)系最近。該基因在不同組織中均有表達(dá),以皮膚組織表達(dá)量最高。4種不同體色大鯢皮膚組織中,黑色皮膚中MC1R基因表達(dá)量高于其他體色。說明大鯢MC1R基因在體色形成過程中可能具有與其他兩棲動(dòng)物不同的調(diào)控機(jī)制。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    1.2 主要試劑
    1.3 主要儀器
2 方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
    2.2 RNA提取
    2.3 反轉(zhuǎn)錄
    2.4 MC1R基因擴(kuò)增及熒光定量PCR引物設(shè)計(jì)與合成
    2.5 MC1R基因序列分析
    2.6 qRT-PCR分析大鯢MC1R和MITF基因的組織特異性表達(dá)
    2.7 qRT-PCR分析不同體色大鯢MC1R基因的特異性表達(dá)
3 結(jié)果與分析
    3.1 RNA提取效果檢測(cè)
    3.2 MC1R和MITF基因的電子克隆及序列分析
    3.3 MC1R基因核苷酸同源性比較及系統(tǒng)進(jìn)化樹構(gòu)建
    3.4 大鯢MC1R基因組織表達(dá)譜差異
4 討論



本文編號(hào)：4017592