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人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞治療對(duì)APPswe/PSEN1雙轉(zhuǎn)基因鼠腦內(nèi)Aβ形成通路的影響

發(fā)布時(shí)間:2024-07-04 20:21
  目的:探討人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞治療對(duì)APPswe/PSEN1雙轉(zhuǎn)基因(AD)鼠腦內(nèi)Aβ形成通路的影響。研究方法:用人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(hUC-MSCs)注射12月齡APPswe/PSEN1雙轉(zhuǎn)基因鼠(實(shí)驗(yàn)組),同等劑量的PBS注射12月齡APPswe/PSEN1雙轉(zhuǎn)基因鼠(對(duì)照組),各組實(shí)驗(yàn)小鼠均在注射2、4、6次后,通過Morris水迷宮檢測(cè)行為學(xué)變化;通過RT-PCR法測(cè)BACE1/APP mRNA水平;通過Western-blot法分別檢測(cè)BACE1/APP/PS1/GFAP/NF-kB蛋白的水平;通過免疫組化法觀察小鼠腦內(nèi)Aβ及海馬齒狀回區(qū)Nestin/Dcx的分布。結(jié)果:分別注射2、4、6次后小鼠的平均潛伏期為:實(shí)驗(yàn)組<對(duì)照組(T=2.419,P<0.05;T=2.448,P<0.05;T=3.048,P<0.01);分別注射2、4、6次后小鼠BACE1mRNA的相對(duì)表達(dá)水平為:實(shí)驗(yàn)組<對(duì)照組(T=14.951,P<0.01;T=21.035,P<0.01;T=24.736,P<0.01);注射2、4、6次后小鼠APP mRNA的...

【文章頁數(shù)】:44 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.光學(xué)顯微鏡下hUC-MSCs成脂分化,油紅染色(40×)

圖1.光學(xué)顯微鏡下hUC-MSCs成脂分化,油紅染色(40×)

圖1.光學(xué)顯微鏡下hUC-MSCs成脂分化,油紅染色化鑒定C-MSCs成骨誘導(dǎo)3后,2%茜素紅染色,在顯即成骨誘導(dǎo)成功,如圖2。圖2.光學(xué)顯微鏡下hUC-MSCs成骨分化,茜素染色


圖3.流式細(xì)胞儀檢測(cè)hUM-MSCs表面標(biāo)志物綜上成脂鑒定、成骨鑒定及免疫表型鑒定結(jié)果,說明本試驗(yàn)所用的hUC-MSCs具有間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性

圖3.流式細(xì)胞儀檢測(cè)hUM-MSCs表面標(biāo)志物綜上成脂鑒定、成骨鑒定及免疫表型鑒定結(jié)果,說明本試驗(yàn)所用的hUC-MSCs具有間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文3.1.2免疫表型測(cè)定用流式細(xì)胞儀檢測(cè)hUC-MSCs,可見其均一高效表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞特異性標(biāo)志物CD105、CD90、CD73,不表達(dá)或者少量表達(dá)造血系列及內(nèi)皮細(xì)胞起源的特異性細(xì)胞標(biāo)志物CD19、CD34、CD11b、CD45及免疫排斥相關(guān)系列....


圖4.Morris水迷宮記錄小鼠軌跡圖

圖4.Morris水迷宮記錄小鼠軌跡圖

3.2.2空間探索軌跡圖Morris水迷宮記錄小鼠軌跡圖如下圖4,由圖可看出訓(xùn)練早期及對(duì)照組的鼠游泳軌跡主要以游泳池邊緣型為主,而實(shí)驗(yàn)組的則以圍繞平臺(tái)周圍、直線型曲線型為主,由此可推測(cè)出hUC-MSCs治療可以改善AD小鼠的空間探索能分組注射2次注射4次....


圖5.BACE1mRNA的相對(duì)表達(dá)量

圖5.BACE1mRNA的相對(duì)表達(dá)量

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文3.3RT-PCR法檢測(cè)BACE1/APPmRNA的相對(duì)表達(dá)水平3.3.1BACE1mRNA的相對(duì)表達(dá)水平如圖5所示,注射2,4,6次后對(duì)實(shí)驗(yàn)組BACE1mRNA的相對(duì)表達(dá)量均低于對(duì)照組,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。



本文編號(hào):4000479

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