1型糖尿病(Type 1 diabetes mellitus,T1D)是一種以胰島β細(xì)胞進(jìn)行性損傷、內(nèi)源性胰島素分泌絕對(duì)不足為主要表現(xiàn)的自身免疫性疾病。目前,胰島素注射仍是治療本病的主要措施。但是,注射胰島素并不能阻止胰島β細(xì)胞的凋亡過(guò)程,脆性糖尿病仍嚴(yán)重影響著患者的生活質(zhì)量。研究表明,即便是T1D患者,體內(nèi)仍存在殘存的胰島β細(xì)胞,且這部分β細(xì)胞仍具有自我復(fù)制和再生的能力^[1]。因此,保護(hù)這部分殘存胰島β細(xì)胞的功能,研究促進(jìn)其再生機(jī)制,對(duì)減少T1D急、慢性并發(fā)癥及脆性糖尿病的發(fā)生具有十分重要的意義。研究發(fā)現(xiàn),Th1/Th2細(xì)胞亞群失衡和B淋巴細(xì)胞的過(guò)渡激活是導(dǎo)致1型糖尿病發(fā)生的重要免疫機(jī)制^[2-4]。IL-10是Th2細(xì)胞分泌的重要細(xì)胞因子,本實(shí)驗(yàn)成功構(gòu)建攜有鼠IL-10基因的腺病毒載體,并證實(shí)補(bǔ)充外源性IL-10基因使其在小鼠體內(nèi)持續(xù)高表達(dá),可以糾正失衡的Th細(xì)胞亞群比例^[5]。CD20是B淋巴細(xì)胞表面重要的細(xì)胞分子,抗CD20單克隆抗體特異性與CD20結(jié)合,可以介導(dǎo)B淋巴細(xì)胞的凋亡^[6]。本實(shí)驗(yàn)...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
縮略詞索引表
引言
第一章 材料與方法
    1.1 主要儀器
    1.2 主要試劑及耗材
    1.3 方法
        1.3.1 重組腺病毒包裝的細(xì)胞準(zhǔn)備
        1.3.2 包裝重組腺病毒
        1.3.3 重組腺病毒的富集、擴(kuò)增與滴度測(cè)定
        1.3.4 重組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組、處理及標(biāo)本采集
            1.3.4.1 動(dòng)物分組
            1.3.4.2 動(dòng)物處理及標(biāo)本采集
        1.3.5 NOD 鼠血糖、體重及基本生命體征的監(jiān)測(cè)
        1.3.6 HE 染色評(píng)價(jià)胰島炎癥情況
        1.3.7 ELISA
        1.3.8 免疫組化和免疫熒光
        1.3.9 RT-PCR
        1.3.10 Real-Time PCR
        1.3.11 Western blot
        1.3.12 SDS-PAGE 電泳
        1.3.13 免疫印跡
        1.3.14 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第二章 結(jié)果
    2.1 擴(kuò)增腺病毒獲得高滴度病毒原液
    2.2
        2.2.1 各組NOD鼠體重在治療前后無(wú)明顯差異
        2.2.2 NOD鼠血糖在聯(lián)合治療組較低
    2.3 HE染色提示聯(lián)合治療組胰腺炎癥較輕
    2.4 血清IL-10 含量在IL-10 單獨(dú)治療組最高
    2.5 免疫組化
    2.6 免疫熒光示Pdx-1 和胰島素在聯(lián)合治療組高表達(dá)
    2.7 RT-PCR示胰島β細(xì)胞分化關(guān)鍵基因在聯(lián)合治療組高表達(dá)
    2.8 Western blot示 Pdx-1、Pax-4、Nkx6、Mafa蛋白在聯(lián)合治療組高表達(dá)
第三章 討論
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 1型糖尿病胰島β細(xì)胞損傷機(jī)制及再生相關(guān)研究進(jìn)展
    一、T1D發(fā)病機(jī)制研究展
        1.B 細(xì)胞與T1D
        2.T 細(xì)胞與T1D
        3.NK細(xì)胞與T1D
        4.單核-巨噬細(xì)胞與T1D
        5.樹(shù)突狀細(xì)胞與T1D
    二、胰島β細(xì)胞的轉(zhuǎn)化與再生
    綜述參考文獻(xiàn)
在讀期間發(fā)表論文情況
致謝



本文編號(hào)：3987775