為了研究飼料氧化魚油對草魚腸道抗氧化防御能力的影響,以谷胱甘肽/谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(GSH/GSTs)通路為研究對象,以豆油、魚油、氧化魚油為飼料脂肪源分別設(shè)計豆油組(6S)、魚油組(6F)、2%氧化魚油(2OF)、4%氧化魚油(4OF)及6%氧化魚油(6OF)5組等氮、等能半純化飼料,在池塘網(wǎng)箱養(yǎng)殖草魚[平均體重(74.8±1)g]72 d。采用熒光定量PCR(RT-QPCR)的方法,測定了草魚腸道組織中谷氨酸-半胱氨酸連接酶催化亞(GCLC)、谷胱甘肽合成酶(GSS)和谷胱甘肽還原酶(GSR)以及谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶的ω1(GSTω1)、PI-谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GSTPI)和微粒體谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶1(MGSt1)的表達活性,并測定了腸道中谷胱甘肽GSH的含量。結(jié)果顯示,2OF、4OF和6OF組草魚腸道中GSH/GSTs通路基因表達均上調(diào),其中6F組中MSGT1在腸道中表達顯著上調(diào)(P<0.05),4OF組中GSR和MGST1在腸道中表達顯著上調(diào)(P<0.05),6OF中GCLC和MGST1在草魚腸道中表達顯著上調(diào)(P<0.05);GCLC表達活性與飼料中MDA含量呈...

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圖1草魚腸道組織GSH的含量

滅菌水6μL。PCＲ反應采用兩步法，反應條件為:95℃預變性30s、95℃變性5s、60℃退火30s，共40個循環(huán)，最后進行溶解曲線(MeltingCurve)分析。1．4數(shù)據(jù)處理公式:2－△△CT=2－(Ct目的基因－Ct管家基因)，以β－actin為內(nèi)參基因根據(jù)計算公式得到相....

圖2不同飼料組中草魚腸道谷胱甘肽合成酶基因的表達量與6S組比較，GCLC除在6F組草魚腸道中表達

2結(jié)果2．1飼料氧化魚油使腸道谷胱甘肽含量顯著增加養(yǎng)殖72d后，采用試劑盒測定了不同試驗組草魚腸道組織中谷胱甘肽含量，結(jié)果如圖1所示。與6S相比，其他試驗組腸道組織中谷胱甘肽含量均顯著上升(P＜0．05)。注:不同字母表示組間差異顯著(P＜0．05)。圖1草魚腸道組織GSH的含量....

圖3不同飼料組中草魚腸道GSTs的表達量以6S組為對照，GSTω1除在6F組草魚腸道中表

卷第9期林秀秀等飼料氧化魚油對草魚(Ctenopharyngodonidellus)腸道谷胱甘肽/谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶通路基因表達活性的影響隨著飼料中氧化魚油添加量的逐漸增加，GCLC在2OF與4OF組腸道中表達無顯著差異，但6OF組腸道中顯著上調(diào)(P＜0．05)。GSS在2OF、4O....

圖4MDA、POV、AV和(EPA+DHA)與GSH/GSTs通路相關(guān)基因表達量關(guān)系

中國糧油學報2016年第9期(EPA+DHA)的質(zhì)量分數(shù)為10．3%時，MGST1在腸道中的表達量達到了最大值。且MGST1相比6S組的表達量上升率為74．7%～149．6%。圖4MDA、POV、AV和(EPA+DHA)與GSH/GSTs通路相關(guān)基因表達量關(guān)系3討論3．1飼料氧化....

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