低聚葡萄糖氧化酶(Gluco-oligosaccharide oxidase,EC1.1.99.B3,GOOX)可特異性氧化葡萄糖及其通過α-1,4或β-1,4糖苷鍵連接構(gòu)成的七糖及以下低聚糖,生成相應(yīng)的醛糖酸。GOOX在糖酸制備及生物檢測等領(lǐng)域有重要應(yīng)用,但目前僅有三種GOOX被研究報道,開發(fā)新的GOOX對相關(guān)工業(yè)領(lǐng)域有實際應(yīng)用價值。本研究對來自黑曲霉基因組和枯草芽胞桿菌基因組的低聚葡萄糖氧化酶基因進(jìn)行了克隆表達(dá)與酶學(xué)性質(zhì)解析,獲得了如下結(jié)果:從枯草芽胞桿菌基因組中篩查到1個疑似編碼低聚葡萄糖氧化酶的開放閱讀框,在基因組不同位置克隆獲得兩段不同長度基因:bsgoox-L和bsgoox-S,二者的大小分別是1443 bp和1356 bp,同時在黑曲霉基因組中篩查到1個疑似編碼低聚葡萄糖氧化酶的開放閱讀框,angoox;進(jìn)一步通過氨基酸序列比對可知,Angoox和Bsgoox分別與來源于A.piperis CBS 112811和Bacillus velezensis來源的低聚葡萄糖氧化酶具有較高相似性,相似度分別為97.26%和79.27%,二者皆有一個FAD結(jié)合域和黃素結(jié)構(gòu)域,屬于低聚...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１?ＧＯＯＸ氧化機制??Ｆｉｇ?１．１?Ｏｘｉｄａｔｉｏｎ?ｍｅｃｈａｎｉｓｍ?ｏｆ?ＧＯＯＸ??１．２．４低聚葡萄糖氧化酶的催化特性和底物特異性??

源性［３９，４（）］，其中該蛋白被預(yù)測與植物細(xì)胞分裂??素脫氫酶和相關(guān)的黃素蛋白具有相同的結(jié)構(gòu)同源性，這些黃素蛋白都具有保守??的黃素腺嘌呤二核苷酸ＦＡＤ結(jié)合域［４１］，每１?ｍｏｌ酶分子包含１?ｍｏｌ?ＦＡＤ［３２］。低??聚葡萄糖氧化酶中ＦＡＤ輔因子是與半胱氨酸和組氨酸（Ｃｙ....

圖３－３枯草芽胞桿菌基因組電泳圖??Ｆｉｇ．?３－３?Ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｇｅｎｏｍｅｏｆ?Ｂ．?ｓｕｂｔｉｌｉｓ??

天津科技大學(xué)碩士學(xué)位論文??圖３－２不同來源的低聚葡萄糖氧化酶的氨基酸序列比??來源于Ａ?ＣＢＳ?５１３．８８和來源５．?ｓｗｆｏｚ＇／ｈ?１６８的低聚葡萄糖氧化酶用下劃線來表示；??ＦＡＤ結(jié)構(gòu)域開始與結(jié)束位點用圓框標(biāo)出；黃素結(jié)構(gòu)域用方框標(biāo)出；ＦＡＤ連接活性中心用陰??影標(biāo)注，其....

圖３－４黑曲霉ＲＮＡ電泳圖??Ｆｉ．?３－４?Ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｏｆ?Ａ．ｎｉｇｅｒ??

結(jié)果與討論??１?２??＾０＝１２�。�??ＰＨ??圖３－４黑曲霉ＲＮＡ電泳圖??Ｆｉｇ．?３－４?Ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｏｆ?Ａ．ｎｉｇｅｒ??１，２全部為所提取的ＲＮＡ??３．２．３黑曲霉ｃＤＮＡ的合成與基因的擴增??....

圖３－５黑曲霉目的基因ＰＣＲ產(chǎn)物電泳圖??Ｆ．－ａｒｏｓｅｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｈｏｒｅｓｉｓ?ａｎａｌｓｉｓ?ｏｆ?ＰＣＲｒｏｄｕｃｔｓ?ｆｒｏｍ?＾４．?ｎｉｅｒ??

結(jié)果與討論??１?２??＾０＝１２！｜??ＰＨ??圖３－４黑曲霉ＲＮＡ電泳圖??Ｆｉｇ．?３－４?Ａｇａｒｏｓｅ?ｇｅｌ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｏｆ?Ａ．ｎｉｇｅｒ??１，２全部為所提取的ＲＮＡ??３．２．３黑曲霉ｃＤＮＡ的合成與基因的擴增??....

本文編號：3956135