發(fā)布時間：2024-04-14 14:28

　　隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的不斷發(fā)展與轉(zhuǎn)基因作物種植面積的不斷擴(kuò)大,越來越多的轉(zhuǎn)基因食品進(jìn)入到我們的生活中,轉(zhuǎn)基因食品的安全性問題逐漸引起各國的重視及公眾的關(guān)注。因此,對于轉(zhuǎn)基因食品的檢測技術(shù)及檢測方法成為了專家學(xué)者關(guān)注的熱點(diǎn)。本文以大豆及其制品為實(shí)驗(yàn)研究對象,選擇了CTAB法、胍-三氯甲烷法和試劑盒法分別對大豆種子、豆芽和豆?jié){粉DNA進(jìn)行提取,根據(jù)所提DNA的含量及純度選擇出最佳的核酸提取方法用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)分析。結(jié)果顯示:在以大豆及其加工制品作為材料時,CTAB法相較于另兩種方法所提取的DNA含量及純度更高,適合于轉(zhuǎn)基因食品檢測中核酸的提取。本文建立了轉(zhuǎn)基因作物中常見的pCaMV35S、tNOS、t35S、pNOS、pFMV35S、Hpt、CP4-EPSPS、Cry1A.105、Cry2Ab2外源元件的定性PCR檢測方法,相對檢測下限可達(dá)0.1%⁰.5%。建立了轉(zhuǎn)基因作物中常見的pCaMV35S、tNOS、t35S、pFMV35S、Vip3Aa20、Cry1A.105、Cry2Ab2外源元件的SYBR Green I熒光PCR檢測方法,定性檢測限(LOD)可達(dá)18^4...

【文章頁數(shù)】：113 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.22017年全球轉(zhuǎn)基因作物種植的分布情況（來源：ISAAA）

圖1.22017年全球轉(zhuǎn)基因作物種植的分布情況（來源：ISAAA）顯示了2017年全球種植轉(zhuǎn)基因作物的國家及地區(qū)的分布情況轉(zhuǎn)基因的種類和面積是最多的，占全球總種植面積的39.5%。來看，轉(zhuǎn)基因大豆仍是全球種植面積最大的轉(zhuǎn)基因作物，其次棉花、轉(zhuǎn)基因油菜。17年，除了....

圖1.3不同檢測策略示意圖

圖1.3不同檢測策略示意圖目前商業(yè)化種植的轉(zhuǎn)基因油菜、玉米、大豆中用到的啟動子主要有：pCaMV35S，pFMV35S，pNOS，P-ract1，pSSuAra，pTA29；外源表達(dá)基因主要有：amy79，BAR，Barnase，Barstar，bxn，cordapA，Cr....

圖1.4環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增技術(shù)原理

圖1.4環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增技術(shù)原理測光定量PCR技術(shù)定量PCR技術(shù)是目前用于轉(zhuǎn)基因檢測的最成熟和最廣。在轉(zhuǎn)基因熒光定量PCR檢測方法中使用最多的是SYan探針法[39-42]，由于其可以邊擴(kuò)增邊檢測，大大節(jié)省了要進(jìn)行后續(xù)凝膠電泳實(shí)驗(yàn)，避免了交叉污染的可能。PCR....

圖1.5數(shù)字PCR技術(shù)原理

圖1.4環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增技術(shù)原理檢測熒光定量PCR技術(shù)定量PCR技術(shù)是目前用于轉(zhuǎn)基因檢測的最成熟和最廣。在轉(zhuǎn)基因熒光定量PCR檢測方法中使用最多的是SYBqMan探針法[39-42]，由于其可以邊擴(kuò)增邊檢測，大大節(jié)省了要進(jìn)行后續(xù)凝膠電泳實(shí)驗(yàn)，避免了交叉污染的可能....

本文編號：3954825