水稻Xa7基因是一個(gè)具有高抗、廣譜持久抗性的抗白葉枯病基因。對(duì)水稻抗病基因Xa7展開(kāi)克隆研究,不僅能夠豐富關(guān)于植物抗病分子機(jī)制相關(guān)的理論知識(shí),同時(shí)也給與抗病分子育種提供了一個(gè)新的抗源。在前期的研究中,本實(shí)驗(yàn)室利用鎮(zhèn)恢084與成恢448雜交構(gòu)建群體進(jìn)行圖位克隆,結(jié)合對(duì)IRBB7和IR24的BAC文庫(kù)測(cè)序?qū)a7基因精細(xì)定在約120kb區(qū)間內(nèi)。但是由于定位區(qū)間內(nèi)基因組序列與常規(guī)水稻存在很大差異,無(wú)法利用F2代群體的染色體交換對(duì)Xa7進(jìn)行進(jìn)一步精細(xì)定位。本研究通過(guò)對(duì)鎮(zhèn)恢084進(jìn)行輻射誘變,在10000個(gè)M1株系中,篩選得到3個(gè)高度感病突變體。利用PCR對(duì)定位區(qū)間進(jìn)行擴(kuò)增,篩選到一個(gè)Xa7定位區(qū)間染色體發(fā)生大片段缺失的突變體ZM2。遺傳分析表明鎮(zhèn)恢084與ZM2雜交F1抗病,F2群體抗感分離比為3:1,感病表型與缺失位點(diǎn)緊密連鎖。日本晴與ZM2雜交F1感病,F2群體全部感病。通過(guò)對(duì)感病突變體基因組的高通量測(cè)序比對(duì)分析,在Xa7定位區(qū)間染色體缺失了大小為106kb片段,與之前定位的120kb有25kb的重疊區(qū),最終將Xa7定為位在25kb的區(qū)間內(nèi)。通過(guò)生物信息學(xué)分析,在這25kb區(qū)間內(nèi)發(fā)現(xiàn)有2個(gè)...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１植物對(duì)細(xì)菌抗性進(jìn)化模型??Ｆｉｇｕｒｅ?１．１?Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ?ｍｏｄｅｌ?ｏｆ?ｐｌａｎｔ?ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ?ｔｏ?ｂａｃｔｅｒｉａ??

．．病原菌抑制植物的防御反應(yīng)主要是通過(guò)分泌些與植物防ＴＩ反應(yīng)相關(guān)的蛋??白質(zhì)。往往在植物的防御反應(yīng)被抑制的同吋，病原菌的毒性也得到很大的提高。??黃單胞桿菌具有多種分泌機(jī)制，而其中的ＩＩＩ型分泌系統(tǒng)（Ｔ３Ｓ）勹其致病性是最??緊密相關(guān)的。??ＩＩＩ型分泌系統(tǒng)是一種由Ｈｒｐ基因簇編....

圖1.2avrBs3家族的結(jié)構(gòu)lulFig.1.2ConstructiveofavrBs3familyprotein

目前已經(jīng)克隆的ＴＡＬ效應(yīng)因子有：ＡｖｒＸａ２７、ＰｔｈＸｏｌ、ＰｔｈＸｏ３、ＡｖｒＸａ３、??八￥１＾５、八丫以３７、八丫以３１０、卩仆＼〇６』出乂〇７和八￥＾３２３。丁八［效應(yīng)因子卩仆＼〇１??和ＰｔｈＸｏ３以及ＡｖｒＸａ７這３種效應(yīng)因子可以誘導(dǎo)ＭｔＮ３／ｓａｌｉｖａ／ＳＷＥＥ....

圖２．１感病突變體接菌驗(yàn)證??Ｆｉｇ．?２．１?Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ?ｍｕｔａｎｔｓ??

３．２利用ＰＣＲ方法篩選定位區(qū)間染色體發(fā)生缺失的突變體??利用實(shí)驗(yàn)室自主開(kāi)發(fā)的分子標(biāo)記，對(duì)抗感分離植株（ＺＭ２、ＺＭ４、ＺＭ５）進(jìn)??行辦７連鎖分子標(biāo)記分析（如圖２．２）。經(jīng)過(guò)人量的分子標(biāo)記驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)當(dāng)在??定位區(qū)間內(nèi)分子標(biāo)記ＳＭ２０對(duì)ＺＭ２、ＺＭ４、ＺＭ５感病突變體進(jìn)行鑒定分析....

圖2.3感病突變體ZM2的遺傳分析

晴為父本進(jìn)行雜交獲得Ｆｉ，并對(duì)其進(jìn)行繁殖，獲得Ｆ２。在金華對(duì)ＦｊＰＦ２植，在分蘗期對(duì)群體進(jìn)行接菌，調(diào)查發(fā)現(xiàn)鎮(zhèn)恢０８４與ＺＭ２雜交Ｆ１抗體抗感分離比為３：１，感病表型與缺失位點(diǎn)緊密連鎖。日本晴與ＺＭ２病，Ｆ２群體全部感病。進(jìn)一步驗(yàn)證了?ＺＭ２感病突變體的突變是由染色成的。??因此在....

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