目的:從鈣信號及鈣通道角度探索TGF-β對胃癌細(xì)胞干性靶基因Nanog和Oct4表達(dá)及成球能力調(diào)控的相關(guān)機(jī)制,為胃癌干細(xì)胞的調(diào)控機(jī)制提供新的理論依據(jù)。方法:(1)腫瘤細(xì)胞成球?qū)嶒?yàn)比較TGF-β刺激前后和加入BAPTA-AM共同作用后對胃癌MKN45細(xì)胞的成球能力的影響。(2)動態(tài)高速鈣離子成像實(shí)驗(yàn)分別檢測加入TGF-β和不同類型鈣通道阻斷劑(BAPTA-AM、2-APB、SKF96365)后MKN45細(xì)胞內(nèi)鈣的變化;(3)qPCR技術(shù)檢測TGF-β刺激MKN45細(xì)胞后TRPC及TRPV家族各型鈣通道的表達(dá)變化;(4)qPCR技術(shù)及Western-Blot技術(shù)檢測TGF-β刺激后及在BAPTA-AM、2-APB共同作用下MKN45細(xì)胞干性相關(guān)核轉(zhuǎn)錄因子Nanog和Oct4 mRNA及蛋白表達(dá)改變;(5)Western-Blot技術(shù)檢測TGF-β刺激5min,15min,30min,45min,1h及加入2-APB抑制共同作用后MKN45細(xì)胞磷酸化β-catenin(ser675)的變化趨勢,篩選出變化最明顯的時間點(diǎn)。結(jié)果:(1)與對照組比較,10ng/mL TGF-β刺激后,MKN45細(xì)...

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述:轉(zhuǎn)化生長因子β及其受體在消化系統(tǒng)腫瘤中的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號：3915932