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大腸桿菌及其氨基糖苷類修飾酶基因的分子鑒定

發(fā)布時間:2024-02-26 23:09
  大腸埃希氏菌屬于革蘭氏陰性桿菌,俗稱大腸桿菌。大多屬于人腸道共生菌,一定條件下會引起腸道感染,有些特殊血清型具有致病性,嚴(yán)重的會引起敗血癥。大腸桿菌廣泛存在于自然生態(tài)環(huán)境及醫(yī)院、社區(qū)等各個社會環(huán)境中,有些病原性大腸桿菌對于免疫力低下的人群常引起嚴(yán)重流行性腹瀉和肋膜炎等。抗生素發(fā)現(xiàn)以來,被廣泛的應(yīng)用到臨床治療中。然而,由于缺乏及時準(zhǔn)確的大腸桿菌檢測手段導(dǎo)致抗生素的濫用和誤用,使臨床上的大腸桿菌普遍出現(xiàn)耐藥的情況。臨床上很多抗生素已無法達到有效治療的目的,治療多耐藥大腸桿菌感染變得十分艱難,這其中就包括了氨基糖苷類抗生素。而目前被認(rèn)為是“金標(biāo)準(zhǔn)”的手工培養(yǎng)結(jié)合藥敏實驗的病原菌及耐藥性檢測的方法已逐漸無法滿足臨床的需求,十分耗時費力,難以快速診斷細菌感染并提供抗生素用藥指導(dǎo)。臨床檢驗中也有一些全自動檢測儀器,但設(shè)備往往比較昂貴,難以在基層醫(yī)療機構(gòu)推廣。近年來,分子檢測的方法以其檢測精準(zhǔn)、節(jié)省時間等優(yōu)勢逐漸被廣泛接受。基于之前本實驗室已有的鑒定肺炎克雷伯氏菌、銅綠假單胞菌等病原菌的研究基礎(chǔ),我們針對大腸桿菌及幾種典型的氨基糖類抗生素耐藥基因建立了一套快速、準(zhǔn)確的分子檢測方法。該方法相比傳統(tǒng)的培...

【文章頁數(shù)】:87 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖2.1PCR評估大腸桿菌的特異基因

圖2.1PCR評估大腸桿菌的特異基因

昆明理工大學(xué)碩士學(xué)位論文21圖2.1PCR評估大腸桿菌的特異基因Figure2.1SpecificityofthePCRassayfordetectingthetargetgeneofthehypotheticalprotein.M:DLDNA2000marker;其后依次為:8....


圖2.2LAMP評估大腸桿菌的特異基因Figure2.2SpecificityoftheLAMPassayfordetectingthetargetgeneofthehypothetical

圖2.2LAMP評估大腸桿菌的特異基因Figure2.2SpecificityoftheLAMPassayfordetectingthetargetgeneofthehypothetical

昆明理工大學(xué)碩士學(xué)位論文22圖2.2LAMP評估大腸桿菌的特異基因Figure2.2SpecificityoftheLAMPassayfordetectingthetargetgeneofthehypotheticalprotein.M:DLDNA2000marker;其后依次為....


圖2.3以陽性質(zhì)粒為PCR模板的靈敏度評估

圖2.3以陽性質(zhì)粒為PCR模板的靈敏度評估

昆明理工大學(xué)碩士學(xué)位論文23液直接裂解,經(jīng)裂解后的菌液經(jīng)稀釋后用作靈敏度評估實驗的模板,從108稀釋至100個/μL。兩種模板制備的靈敏度PCR評估結(jié)果如2.3及圖2.4所示,結(jié)果表明,無論哪種方式制備的模板其檢測下限均可達到100的數(shù)量級,說明本次實驗所建立的大腸桿菌的PCR檢....


圖2.4以裂解后菌液為PCR模板的靈敏度評估

圖2.4以裂解后菌液為PCR模板的靈敏度評估

昆明理工大學(xué)碩士學(xué)位論文23液直接裂解,經(jīng)裂解后的菌液經(jīng)稀釋后用作靈敏度評估實驗的模板,從108稀釋至100個/μL。兩種模板制備的靈敏度PCR評估結(jié)果如2.3及圖2.4所示,結(jié)果表明,無論哪種方式制備的模板其檢測下限均可達到100的數(shù)量級,說明本次實驗所建立的大腸桿菌的PCR檢....



本文編號:3912003

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