HD-Zip轉(zhuǎn)錄因子是包含同源域(HD)和亮氨酸拉鏈(LZ)基序的一個植物特異性蛋白質(zhì)的大家族,是一類與生長發(fā)育有關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子,為高等植物所特有,在光信號轉(zhuǎn)導、非生物脅迫及器官發(fā)育等生命活動中發(fā)揮重要作用。本文克隆了小黑楊PsnHB22基因,并對其進行了生物信息學分析,研究了 PsnHB22蛋白與PsnCYCD1;1蛋白的相互作用情況,以及轉(zhuǎn)PsnHB22基因的煙草的生物學特性。主要結(jié)果如下:(1)小黑楊PsnHB22基因CDS序列全長為549 bp,編碼一個由182個氨基酸殘基組成的蛋白序列,蛋白是不含信號肽和跨膜螺旋區(qū)的不穩(wěn)定親水性蛋白,核苷酸區(qū)域內(nèi)有ZF-HD-dimer結(jié)構(gòu)域和homeo-ZF-HD結(jié)構(gòu)域;分析系統(tǒng)進化樹發(fā)現(xiàn),PsnHB22蛋白與同屬的毛果楊(Populus trichocfarpa)和不同屬的小墊柳(Salix brachista)同源性較高。(2)構(gòu)建pGBKT7-PsnHB22酵母表達載體,通過實驗證明PsnHB22蛋白無自激活活性且對Y2Hgold菌株不存在毒性影響;通過酵母雙雜交實驗證明PsnHB22蛋白與PsnCYCD1;1蛋白存在相互作用,推測Ps...

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１?ＰｓｎＣＦＣＺ）／：ｉ轉(zhuǎn)基因小黒楊表型觀察??ａ．?以轉(zhuǎn)基因小黑楊植株觀察；ｂ．?轉(zhuǎn)基因小黑楊莖干觀察??

７．０?７．０??滅菌方式?１２１?°Ｃ?２０?ｍｉｎ?１２１Ｘ２０?ｍｉｎ???保存溫度?４＿＾Ｃ?４°Ｃ???２．１．５引物合成及測序??基因克壟載體構(gòu)建等所用引物由北京擎科新業(yè)生物技術(shù)有限公司合成，測序工作??由北京擎科新業(yè)生物技術(shù)有限公司及吉林省庫美生物科技有限公司完成。....

圖２－２?基因的克隆及鑒定??．．．．．－－??

?２小黑楊ＰｓｎＨＢ２２基因的克隆及生物信息學分析???２．３結(jié)果分析??２．３．１小黑楊基因的克隆??提取小黑楊葉片總ＲＮＡ，并將其反轉(zhuǎn)錄后的ｃＤＮＡ作為模板，進行目的基因的擴??增，經(jīng)電泳檢測，目的條帶大小與預期大小一致（圖２－２?Ａ）。膠回收目的條帶后與??ｐＥＡＳＹ－Ｔｌ....

圖２－３小黑楊基因ｅＤＮＡ序列及氨基酸序列??

ＡＧＧ?ＴＴＴ?ＴＧＴ?ＧＡＡ?ＧＧＡ?ＡＴＴ?ＧＧＧ?ＧＴＴ??１３６?ＤＥＥＤＥＶＥＲＦＣＥＧＩＧＶ??４５１?ＡＧＣ?ＡＧＡＣＡＧ?ＧＴＴＴＴＴＡＡＡＧＴＴＴＧＧ?ＡＴＯ?ＣＡＴＡＡＴＣＡＴＡＡＧ?ＡＡＴＴＣＴ??１５１?Ｓ?Ｒ?Ｑ?Ｖ?Ｆ?Ｋ?Ｖ?Ｗ?Ｍ?Ｈ?Ｎ?Ｈ?Ｋ?....

圖２－９?ＨＢ２２蛋白系統(tǒng)進化樹分析??２．４本章小結(jié)??

２小黑楊ＰｓｎＨＢ２２基因的克隆及生物信息學分析???２．３．２．３小黑楊ＰｓｎＨＢ２２蛋白保守結(jié)構(gòu)域分析??利用ＮＣＢＩ中的程序ＣＤ－Ｓｅａｒｃｈ預測小黑楊ＰｓｎＨＢ２２蛋白保守結(jié)構(gòu)域，結(jié)果表明在??第２５－１７４核苷酸區(qū)域內(nèi)含有ＺＦ－ＨＤ－ｄｉｍｅｒ結(jié)構(gòu)域，第３１６－４８９核....

本文編號：3911951