研究目的:RRS1(核糖體合成調(diào)節(jié)蛋白1)是島津于1999年在酵母中發(fā)現(xiàn)的一種新型核糖體合成調(diào)節(jié)蛋白,它在核糖體生物合成中參與25s rRNA的成熟和60s核糖體大亞基的組裝。近幾年研究發(fā)現(xiàn)RRS1在人類某些腫瘤中過表達(dá),與結(jié)直腸癌,肝癌和乳腺癌的增殖有關(guān),但其在乳腺癌轉(zhuǎn)移中的作用仍不清楚。本研究通過體外乳腺癌細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)小鼠乳腺癌模型探討人源RRS1/小鼠源Rrs1對乳腺癌轉(zhuǎn)移的影響。研究方法:(1)蛋白免疫印跡法(WB)和實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)檢測RRS1在人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞、小鼠乳腺癌4T1細(xì)胞及正常乳腺上皮細(xì)胞HMEC中蛋白及mRNA水平的表達(dá)量。(2)MDA-MB-231細(xì)胞采用慢病毒ShRNA-RRS1轉(zhuǎn)染的方式,敲降RRS1基因的表達(dá)量,4T1細(xì)胞采用小干擾siRNA-Rrs1轉(zhuǎn)染的方式,敲降Rrs1基因的表達(dá)量,并用質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的方式過表達(dá)Rrs1。轉(zhuǎn)染結(jié)束,使用熒光顯微鏡觀察細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率,并用qPCR和Western Blotting進(jìn)一步檢測RRS1敲降效率、Rrs1敲降及過表達(dá)效率。(3)采用CCK8實(shí)驗(yàn)檢測MDA-MB-231細(xì)胞RRS1...

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【學(xué)位級別】：碩士

圖1（A、B）WB檢測RRS1基因在乳腺癌細(xì)胞MCF7，BT549，MDA-MB-231，4T1和正常乳腺細(xì)胞HMEC中的表達(dá)量

圖3（A）CCK8實(shí)驗(yàn)檢測Rrs1基因敲降后，對4T1細(xì)胞增殖的抑制作用，Rrs1過表達(dá)后，對4T1細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用

圖4(A)劃痕實(shí)驗(yàn)檢測小鼠乳腺癌4T1細(xì)胞與人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞中RRS1/Rrs1基因?qū)?xì)胞遷移的影響,每組n=4，Bar=200μm,**P<0.01

圖5（A）全功能微孔板檢測儀檢測，LUC-4T1細(xì)胞化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度是4T1細(xì)胞的5倍

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