目的探討在前列腺癌PC3細(xì)胞系中高表達的己糖激酶-2基因(HK2基因)對與PC3細(xì)胞系共培養(yǎng)體系里的輔助性T細(xì)胞1和輔助性T細(xì)胞2(TH1/TH2)的影響。方法通過shRNA構(gòu)建慢病毒感染PC3細(xì)胞系產(chǎn)生HK2基因敲低的PC3細(xì)胞系的實驗組細(xì)胞(sh-HK2),同時使用無義序列構(gòu)建慢病毒感染PC3細(xì)胞系獲得陰性對照細(xì)胞(NC),qPCR與Western blot驗證敲低結(jié)果。培養(yǎng)前列腺癌細(xì)胞(NC和sh-HK2)48 h后分離癌細(xì)胞獲得上清液,提取健康人外周血單個核細(xì)胞(PBMCs)。TH1空白組:PBMCs在TH1誘導(dǎo)條件下使用1640培養(yǎng)基培養(yǎng)48 h;TH1實驗組(TH1 sh-HK2組):PBMCs在TH1誘導(dǎo)條件下使用培養(yǎng)過穩(wěn)轉(zhuǎn)株的上清液共培養(yǎng)48 h;TH1陰性對照組(TH1 NC組):PBMCs在TH1誘導(dǎo)條件下使用培養(yǎng)過陰性對照細(xì)胞的上清液共培養(yǎng)48 h。TH2空白組、TH2實驗組(TH2 sh-HK2組)、TH2陰性對照組(TH2 NC組)誘導(dǎo)條件變更為TH2誘導(dǎo)條件,其他不變。48 h后分光光度儀檢測各共培養(yǎng)體系中乳酸水平。然后提取各組中PBMCs使用植物血凝素-M...

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