家蠶絲腺是一個(gè)龐大的蛋白質(zhì)資源庫,絲腺細(xì)胞能夠高效合成蠶絲蛋白,而蠶絲蛋白合成過程是極其復(fù)雜的調(diào)控系統(tǒng),其中絲腺特異性轉(zhuǎn)錄因子起著非常重要的作用.FMBP-1是家蠶體內(nèi)一種重要的絲腺特異性轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子,分析該基因?qū)πQ絲蛋白合成的作用,有利于探究蠶絲蛋白合成的機(jī)理,完善蠶絲蛋白表達(dá)調(diào)控的分子機(jī)制.本研究以不同絲量家蠶品種菁松、皓月、大造和鎮(zhèn)江野桑蠶為供試材料,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和RNAi技術(shù)檢測(cè)分析了五齡家蠶絲腺中FMBP-1基因的轉(zhuǎn)錄水平以及FMBP-1基因?qū)z蛋白表達(dá)的影響,結(jié)果表明:在家蠶多絲量品種的絲腺中FMBP-1基因的表達(dá)量顯著高于低絲量品種;五齡4 d家蠶喂食保幼激素后,家蠶絲腺內(nèi)FMBP-1基因的表達(dá)量顯著高于對(duì)照組;經(jīng)RNAi處理后,家蠶蛹稍小、繭層率降低、蛾腹部皺縮,且絲腺中絲蛋白基因的表達(dá)水平也顯著降低.研究結(jié)果提示:家蠶絲腺特異性轉(zhuǎn)錄因子FMBP-1在蠶絲蛋白的合成過程中作為正調(diào)節(jié)因子,發(fā)揮著重要的作用.

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【文章目錄】：
1 實(shí)驗(yàn)
    1.1 材料與主要試劑
    1.2 方法
        1.2.1 保幼激素溶液的配制及添食
        1.2.2 家蠶絲腺總RNA的提取及cDNA第1鏈合成
        1.2.3 引物設(shè)計(jì)
        1.2.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
        1.2.5 RNAi分析
    1.3 數(shù)據(jù)處理
2 結(jié)果與分析
    2.1 FMBP-1基因在不同品種家蠶和野蠶絲腺中的轉(zhuǎn)錄水平差異
    2.2 添食保幼激素對(duì)五齡幼蟲絲腺中FMBP-1基因轉(zhuǎn)錄水平的影響
    2.3 RNAi對(duì)家蠶幼蟲FMBP-1基因干擾效果及影響分析
        2.3.1 RNAi對(duì)家蠶絲腺FMBP-1基因轉(zhuǎn)錄水平的影響
        2.3.2 干擾FMBP-1基因表達(dá)對(duì)家蠶表型性狀的影響
        2.3.3 干擾FMBP-1基因表達(dá)對(duì)絲蛋白基因轉(zhuǎn)錄水平的影響
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