目的探討核因子(NF)-κB在慢病毒轉(zhuǎn)染過表達(dá)及沉默三葉因子(TFF)3基因的人非小細(xì)胞肺癌A549細(xì)胞中的表達(dá)意義。方法慢病毒包裝TFF3基因全長片斷及TFF3短發(fā)卡RNA質(zhì)粒,病毒液轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞,獲得穩(wěn)定過表達(dá)及沉默TFF3表達(dá)的A549細(xì)胞株,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)和Western印跡法檢測TFF3、NF-κB、B細(xì)胞淋巴瘤基因(Bcl)-2、細(xì)胞周期蛋白(Cyclin)D1基因及蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果過表達(dá)TFF3的A549細(xì)胞(TFF3)中TFF3基因較對照組增高(655±135)倍,蛋白水平較Vec組顯著增高;沉默TFF3基因的A549細(xì)胞(shTFF3)沉默TFF3效率約為75%,蛋白水平也較shCK組明顯降低(均P<0.01)。TFF3組NF-κB、Bcl-2、CyclinD1 mRNA及蛋白表達(dá)水平明顯高于Vec組(P<0.05),shTFF3組NF-κB、Bcl-2、CyclinD1 mRNA及蛋白水平較shCK組明顯降低(P<0.01)。結(jié)論 TFF3的表達(dá)與NF-κB密切相關(guān),過表達(dá)TFF3能夠激活NF-κB,促進(jìn)CyclinD1和抗...

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.3 慢病毒包裝TFF3增強(qiáng)和沉默質(zhì)粒
    1.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測目的基因的表達(dá)水平
    1.5 Western印跡蛋白檢測
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié) 果
    2.1 慢病毒轉(zhuǎn)染后穩(wěn)轉(zhuǎn)株建立
    2.2 NF-κB mRNA、Bcl-2 mRNA、CyclinD1 mRNA相對表達(dá)量變化
    2.3 NF-κB、Bcl-2、CyclinD1蛋白在過表達(dá)及沉默TFF3基因的A549細(xì)胞中的表達(dá)變化
3 討 論



本文編號：3852295