黃瓜(Cucumis sativus)是我國主要的設施蔬菜之一,其在生產(chǎn)上持續(xù)地遭受白粉病菌[Sphaerotheca fuliginea(Schlecht)Poll.]等病原菌的侵染,造成大面積減產(chǎn)。本實驗室前期研究表明,翻譯控制腫瘤蛋白(translationally controlled tumor protein,TCTP)可能負調(diào)控黃瓜抗白粉病。本研究首先通過CsTCTP1和CsTCTP2基因異源轉(zhuǎn)化擬南芥,獲得CsTCTP1/CsTCTP2基因恢復系植株和過表達系植株,其次,對不同品系的擬南芥表型進行分析,明確CsTCTP1/CsTCTP2基因?qū)χ仓晟L發(fā)育的影響;同時,通過對不同品系擬南芥接種白粉病菌,揭示CsTCTP1/CsTCTP2基因在擬南芥響應白粉病菌(Golovinomyces cichoracearum)侵染中的作用,初步探究了CsTCTP1/CsTCTP2基因在調(diào)控擬南芥響應白粉病菌侵染過程中參與的信號途徑。本研究將為深入研究黃瓜CsTCTP在平衡調(diào)控植物生長發(fā)育與免疫響應中作用及機制提供有益的證據(jù)。主要研究結(jié)果如下:1.將構(gòu)建完成的CsTCTP1/CsTC...

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 植物TCTP的分子特征
    1.2 植物TCTP表達模式
    1.3 植物TCTP的生物學功能
        1.3.1 TCTP對植物生長發(fā)育的影響
            1.3.1.1 調(diào)控細胞增殖
            1.3.1.2 調(diào)控側(cè)根形成
            1.3.1.3 調(diào)控果實成熟
            1.3.1.4 調(diào)控細胞凋亡
        1.3.2 TCTP在植物非生物脅迫中的作用
            1.3.2.1 干旱脅迫
            1.3.2.2 溫度脅迫
            1.3.2.3 鹽脅迫
            1.3.2.4 金屬離子脅迫
            1.3.2.5 其它非生物脅迫
        1.3.3 TCTP在植物生物脅迫中的作用
            1.3.3.1 病原菌和病毒的侵染
            1.3.3.2 昆蟲侵襲
    1.4 本研究的目的和意義
    1.5 技術(shù)路線
第二章 CsTCTP1和CsTCTP2 在擬南芥中的遺傳轉(zhuǎn)化
    2.1 試驗材料
        2.1.1 載體及菌株
        2.1.2 植物材料
        2.1.3 試劑配制
        2.1.4 引物合成
    2.2 方法
        2.2.1 穩(wěn)定遺傳轉(zhuǎn)化WT擬南芥
        2.2.2 過表達轉(zhuǎn)基因植株篩選
        2.2.3 擬南芥葉片DNA提取
        2.2.4 擬南芥葉片RNA提取
        2.2.5 擬南芥c DNA的合成
        2.2.6 轉(zhuǎn)基因植株的檢測
        2.2.7 RT-PCR法鑒定恢復株系與過表達株系純合體
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 轉(zhuǎn)基因植株的篩選
        2.3.2 轉(zhuǎn)基因植株的分子鑒定
    2.4 討論
    2.5 本章小結(jié)
第三章 CsTCTP1和CsTCTP2 基因?qū)M南芥生長發(fā)育的影響
    3.1 材料
    3.2 方法
        3.2.1 擬南芥種子處理
        3.2.2 種子萌發(fā)率統(tǒng)計及根長檢測
        3.2.3 擬南芥的形態(tài)觀察
        3.2.4 實時熒光定量PCR(RT-qPCR)
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 CsTCTP1和CsTCTP2 基因?qū)M南芥萌發(fā)及根長的影響
        3.3.2 CsTCTP1和CsTCTP2 基因?qū)M南芥萌蓮座葉形態(tài)的影響
        3.3.3 CsTCTP1和CsTCTP2 基因?qū)M南芥株高及果莢的影響
        3.3.4 CsTCTP1和CsTCTP2 基因?qū)M南芥生長周期的影響
        3.3.5 擬南芥內(nèi)源基因的表達變化
    3.4 討論
        3.4.1 CsTCTP1和CsTCTP2 基因?qū)χ参锷L發(fā)育的影響
        3.4.2 CsTCTP1和CsTCTP2 基因參與的信號通路分析
    3.5 本章小結(jié)
第四章 CsTCTPs在擬南芥響應白粉病菌脅迫中的功能分析
    4.1 材料
    4.2 方法
        4.2.1 擬南芥接種白粉病菌
        4.2.2 擬南芥病情指數(shù)調(diào)查
        4.2.3 RT-qPCR
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 轉(zhuǎn)基因擬南芥對白粉病的抗性鑒定
        4.3.2 CsTCTP1和CsTCTP2 基因?qū)OR信號的調(diào)控
        4.3.3 CsTCTP1 基因?qū)BA信號的調(diào)控
        4.3.4 CsTCTP1 基因?qū)Ψ烙嚓P(guān)基因的表達調(diào)控
    4.4 討論
        4.4.1 轉(zhuǎn)基因擬南芥對白粉病的抗性分析
        4.4.2 CsTCTP1和CsTCTP2 在擬南芥響應白粉病菌侵染中的作用
    4.5 本章小結(jié)
總結(jié)與展望
參考文獻
致謝
攻讀學位期間發(fā)表學術(shù)論文



本文編號：3849351