發(fā)布時(shí)間：2023-09-29 05:11

　　黃瓜(Cucumis sativus)是我國(guó)主要的設(shè)施蔬菜之一,其在生產(chǎn)上持續(xù)地遭受白粉病菌[Sphaerotheca fuliginea(Schlecht)Poll.]等病原菌的侵染,造成大面積減產(chǎn)。本實(shí)驗(yàn)室前期研究表明,翻譯控制腫瘤蛋白(translationally controlled tumor protein,TCTP)可能負(fù)調(diào)控黃瓜抗白粉病。本研究首先通過CsTCTP1和CsTCTP2基因異源轉(zhuǎn)化擬南芥,獲得CsTCTP1/CsTCTP2基因恢復(fù)系植株和過表達(dá)系植株,其次,對(duì)不同品系的擬南芥表型進(jìn)行分析,明確CsTCTP1/CsTCTP2基因?qū)χ仓晟L(zhǎng)發(fā)育的影響;同時(shí),通過對(duì)不同品系擬南芥接種白粉病菌,揭示CsTCTP1/CsTCTP2基因在擬南芥響應(yīng)白粉病菌(Golovinomyces cichoracearum)侵染中的作用,初步探究了CsTCTP1/CsTCTP2基因在調(diào)控?cái)M南芥響應(yīng)白粉病菌侵染過程中參與的信號(hào)途徑。本研究將為深入研究黃瓜CsTCTP在平衡調(diào)控植物生長(zhǎng)發(fā)育與免疫響應(yīng)中作用及機(jī)制提供有益的證據(jù)。主要研究結(jié)果如下:1.將構(gòu)建完成的CsTCTP1/CsTC...

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 植物TCTP的分子特征
    1.2 植物TCTP表達(dá)模式
    1.3 植物TCTP的生物學(xué)功能
        1.3.1 TCTP對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育的影響
            1.3.1.1 調(diào)控細(xì)胞增殖
            1.3.1.2 調(diào)控側(cè)根形成
            1.3.1.3 調(diào)控果實(shí)成熟
            1.3.1.4 調(diào)控細(xì)胞凋亡
        1.3.2 TCTP在植物非生物脅迫中的作用
            1.3.2.1 干旱脅迫
            1.3.2.2 溫度脅迫
            1.3.2.3 鹽脅迫
            1.3.2.4 金屬離子脅迫
            1.3.2.5 其它非生物脅迫
        1.3.3 TCTP在植物生物脅迫中的作用
            1.3.3.1 病原菌和病毒的侵染
            1.3.3.2 昆蟲侵襲
    1.4 本研究的目的和意義
    1.5 技術(shù)路線
第二章 CsTCTP1和CsTCTP2 在擬南芥中的遺傳轉(zhuǎn)化
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 載體及菌株
        2.1.2 植物材料
        2.1.3 試劑配制
        2.1.4 引物合成
    2.2 方法
        2.2.1 穩(wěn)定遺傳轉(zhuǎn)化WT擬南芥
        2.2.2 過表達(dá)轉(zhuǎn)基因植株篩選
        2.2.3 擬南芥葉片DNA提取
        2.2.4 擬南芥葉片RNA提取
        2.2.5 擬南芥c DNA的合成
        2.2.6 轉(zhuǎn)基因植株的檢測(cè)
        2.2.7 RT-PCR法鑒定恢復(fù)株系與過表達(dá)株系純合體
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 轉(zhuǎn)基因植株的篩選
        2.3.2 轉(zhuǎn)基因植株的分子鑒定
    2.4 討論
    2.5 本章小結(jié)
第三章 CsTCTP1和CsTCTP2 基因?qū)M南芥生長(zhǎng)發(fā)育的影響
    3.1 材料
    3.2 方法
        3.2.1 擬南芥種子處理
        3.2.2 種子萌發(fā)率統(tǒng)計(jì)及根長(zhǎng)檢測(cè)
        3.2.3 擬南芥的形態(tài)觀察
        3.2.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR)
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 CsTCTP1和CsTCTP2 基因?qū)M南芥萌發(fā)及根長(zhǎng)的影響
        3.3.2 CsTCTP1和CsTCTP2 基因?qū)M南芥萌蓮座葉形態(tài)的影響
        3.3.3 CsTCTP1和CsTCTP2 基因?qū)M南芥株高及果莢的影響
        3.3.4 CsTCTP1和CsTCTP2 基因?qū)M南芥生長(zhǎng)周期的影響
        3.3.5 擬南芥內(nèi)源基因的表達(dá)變化
    3.4 討論
        3.4.1 CsTCTP1和CsTCTP2 基因?qū)χ参锷L(zhǎng)發(fā)育的影響
        3.4.2 CsTCTP1和CsTCTP2 基因參與的信號(hào)通路分析
    3.5 本章小結(jié)
第四章 CsTCTPs在擬南芥響應(yīng)白粉病菌脅迫中的功能分析
    4.1 材料
    4.2 方法
        4.2.1 擬南芥接種白粉病菌
        4.2.2 擬南芥病情指數(shù)調(diào)查
        4.2.3 RT-qPCR
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 轉(zhuǎn)基因擬南芥對(duì)白粉病的抗性鑒定
        4.3.2 CsTCTP1和CsTCTP2 基因?qū)OR信號(hào)的調(diào)控
        4.3.3 CsTCTP1 基因?qū)BA信號(hào)的調(diào)控
        4.3.4 CsTCTP1 基因?qū)Ψ烙嚓P(guān)基因的表達(dá)調(diào)控
    4.4 討論
        4.4.1 轉(zhuǎn)基因擬南芥對(duì)白粉病的抗性分析
        4.4.2 CsTCTP1和CsTCTP2 在擬南芥響應(yīng)白粉病菌侵染中的作用
    4.5 本章小結(jié)
總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文



本文編號(hào)：3849351