灰葡萄孢(Botrytis cinerea)是引起植物灰霉病的一種重要的植物病原真菌,其寄主范圍廣泛,常給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。挖掘植物抗灰葡萄孢的相關(guān)基因,探究其抗病的分子機(jī)制,為闡明植物與灰葡萄孢互作的分子機(jī)理及灰霉病的防治奠定基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)室前期研究獲得了擬南芥抗灰葡萄孢相關(guān)基因SDR6,明確了SDR6基因參與擬南芥對(duì)灰葡萄孢和Pst DC3000(Pseudomonas syringae pv.tomato DC3000)的抗性。本研究對(duì)SDR6基因與SA、JA信號(hào)途徑的關(guān)系進(jìn)行分析;檢測(cè)SDR6基因調(diào)控?cái)M南芥抗灰葡萄孢和Pst DC3000的機(jī)制;通過(guò)酵母雙雜交技術(shù)、雙分子熒光互補(bǔ)技術(shù),鑒定SDR6的候選互作蛋白。研究結(jié)果為進(jìn)一步闡明擬南芥SDR6基因調(diào)控?cái)M南芥抗病的分子機(jī)制奠定基礎(chǔ)。1.利用RT-qPCR技術(shù),檢測(cè)SA、BTH、ACC、MeJA處理擬南芥野生型Col-0和SA、JA/ET信號(hào)途徑突變體中SDR6基因的表達(dá)情況,分析SDR6基因與SA、JA/ET信號(hào)途徑的關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn),野生型中,SA、BTH和MeJA處理對(duì)SDR6基因的表達(dá)均有誘導(dǎo)作用;SA信號(hào)途徑突變體...

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮寫(xiě)表
1 引言
    1.1 擬南芥抗病相關(guān)基因的研究現(xiàn)狀
    1.2 SDR家族研究現(xiàn)狀
    1.3 本研究的目的和意義
2 材料和方法
    2.1 供試材料
        2.1.1 供試擬南芥、菌株
        2.1.2 供試試劑
        2.1.3 供試儀器設(shè)備
        2.1.4 供試培養(yǎng)基、緩沖溶液
    2.2 擬南芥的種植
    2.3 擬南芥總RNA的提取及cDNA合成
        2.3.1 擬南芥總RNA的提取
        2.3.2 cDNA的合成
    2.4 SDR6基因與SA、JA/ET信號(hào)途徑的關(guān)系分析
        2.4.1 擬南芥野生型中SDR6基因的表達(dá)分析
        2.4.2 SA、JA/ET信號(hào)途徑突變體中SDR6基因的表達(dá)分析
    2.5 SDR6基因調(diào)控?cái)M南芥抗灰葡萄孢的機(jī)制分析
        2.5.1 SDR6基因突變體對(duì)灰葡萄孢抗病性的測(cè)定
        2.5.2 灰葡萄孢對(duì)抗病相關(guān)基因表達(dá)的影響
    2.6 SDR6基因調(diào)控?cái)M南芥抗PstDC3000的機(jī)制分析
        2.6.1 SDR6基因突變體對(duì)PstDC3000的抗病性測(cè)定
        2.6.2 PstDC3000對(duì)抗病相關(guān)基因表達(dá)的影響
    2.7 SDR6基因候選互作蛋白的鑒定
        2.7.1 SDR6基因候選互作蛋白的酵母雙雜交鑒定
        2.7.2 SDR6候選互作蛋白的亞細(xì)胞定位分析
        2.7.3 SDR6基因候選互作蛋白的雙分子熒光互補(bǔ)鑒定
3 結(jié)果與分析
    3.1 SDR6基因與SA、JA/ET信號(hào)途徑的關(guān)系分析
        3.1.1 擬南芥野生型中SDR6基因的表達(dá)分析
        3.1.2 SA、JA/ET信號(hào)途徑突變體中SDR6基因的表達(dá)分析
    3.2 SDR6基因調(diào)控?cái)M南芥抗灰葡萄孢的機(jī)制分析
        3.2.1 SDR6基因突變體對(duì)灰葡萄孢抗病性的測(cè)定
        3.2.2 灰葡萄孢對(duì)抗病相關(guān)基因表達(dá)的影響
    3.3 SDR6基因調(diào)控?cái)M南芥抗PstDC3000的機(jī)制分析
        3.3.1 SDR6基因突變體對(duì)PstDC3000的抗病性測(cè)定
        3.3.2 PstDC3000對(duì)抗病相關(guān)基因表達(dá)的影響
    3.4 SDR6基因候選互作蛋白的鑒定
        3.4.1 SDR6基因候選互作蛋白的酵母雙雜交鑒定
        3.4.2 SDR6候選互作蛋白的亞細(xì)胞定位分析
        3.4.3 SDR6基因候選互作蛋白的雙分子熒光互補(bǔ)鑒定
4 討論
    4.1 SDR6基因與SA、JA/ET信號(hào)途徑的關(guān)系
    4.2 SDR6及其候選互作蛋白的驗(yàn)證
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)歷
致謝
詳細(xì)摘要



本文編號(hào)：3837177