發(fā)布時間：2023-06-18 03:50

　　目的:牙周炎是牙菌斑中的微生物所引起的牙周支持組織的慢性感染性疾病,可導致牙周支持組織的破壞。牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)是牙周炎的主要致病菌,可以通過多種途徑逃避宿主天然免疫系統(tǒng)的防御。巨噬細胞是機體內(nèi)重要的效應細胞,其可以活化為不同的表型如經(jīng)典活化巨噬細胞(M1型)和選擇性活化巨噬細胞(M2型)。PG0352是P.gingivalis W83中唯一編碼唾液酸酶的基因。我們構(gòu)建了P.gingivalis W83唾液酸酶基因突變株(ΔPG0352)。研究發(fā)現(xiàn)該突變株更易于被巨噬細胞所清除,并且這種作用可能與ΔPG0352促進巨噬細胞的M1極化有關(guān)。因此,我們推測ΔPG0352可能是通過促進巨噬細胞的M1極化,進而增強巨噬細胞的免疫清除能力。本研究目的是利用P.gingivalis W83、ΔPG0352、回復株comΔPG0352和E.coli分別感染巨噬細胞,檢測它們對巨噬細胞極化、抗原提呈能力和吞噬能力的影響,并建立大鼠牙周炎模型驗證體外實驗的結(jié)果。旨在探索唾液酸酶基因缺失對巨噬細胞極化及吞噬能力的影響,為慢性牙周炎的...

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料方法
    2.1 主要試劑和儀器
        2.1.1 主要設(shè)備
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 實驗菌株及細胞
    2.2 實驗方法
        2.2.1 菌株和生長條件
        2.2.2 細胞的培養(yǎng)和巨噬細胞的準備
        2.2.3 透射電鏡觀察
        2.2.4 ELISA檢測IL-12、iNOS、IL-10和Arg-1 的水平
        2.2.5 免疫熒光檢測不同菌株感染巨噬細胞后MHC-II的表達
        2.2.6 流式細胞術(shù)檢測巨噬細胞表面CD68、CD80和CD206 的表達
        2.2.7 流式細胞術(shù)檢測巨噬細胞吞噬活性
        2.2.8 大鼠牙周炎模型的構(gòu)建
        2.2.9 免疫組化染色分析大鼠牙齦組織CD163和i NOS的表達
        2.2.10 體視顯微鏡觀察大鼠牙槽骨吸收情況
    2.3 統(tǒng)計分析
3 結(jié)果
    3.1 PMA誘導U937細胞向M0型巨噬細胞分化
    3.2 細菌感染巨噬細胞后巨噬細胞形態(tài)的改變
    3.3 ΔPG0352對巨噬細胞M1和M2極化因子的影響
    3.4 ΔPG0352增強了巨噬細胞M1極化表面標志物的表達
    3.5 巨噬細胞對ΔPG0352的吞噬能力增強
    3.6 牙齦組織中 iNOS 和CD163表達水平
    3.7 牙槽骨吸收情況
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
病例報告
    參考文獻
攻讀學位期間取得的科研成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3834722