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銹色棕櫚象嗅覺相關(guān)基因鑒定、組織表達(dá)譜及信息素誘捕技術(shù)研究

發(fā)布時(shí)間:2023-06-03 14:19
  銹色棕櫚象是危害棕櫚科植物的重大入侵害蟲之一,嚴(yán)重影響了我國(guó)熱帶生態(tài)建設(shè)和區(qū)域經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。昆蟲嗅覺在寄主定位、生殖活動(dòng)和躲避天敵中發(fā)揮著重要作用,而嗅覺基因是昆蟲嗅覺活動(dòng)的分子基礎(chǔ)。因此,對(duì)其嗅覺感受機(jī)制和誘捕技術(shù)研究有利于提高銹色棕櫚象的綠色防控。本研究突破人工飼養(yǎng)難題,利用基因組和轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)鑒定出嗅覺相關(guān)基因,對(duì)其進(jìn)行表達(dá)譜分析,明確了基因沉默對(duì)銹色棕櫚象識(shí)別聚集信息素的影響,摸清了聚集信息素林間誘捕條件、評(píng)價(jià)了誘捕效果。主要結(jié)果如下:1.人工飼養(yǎng)技術(shù)。研發(fā)出半人工飼料及飼養(yǎng)技術(shù),以自然寄主大王棕和甘蔗為對(duì)照,連續(xù)飼養(yǎng)3代,半人工飼料飼養(yǎng)的幼蟲和蛹?xì)v期(40.20 d和33.99 d)顯著低于對(duì)照組,幼蟲存活率(63.87%)顯著高于對(duì)照組(37.99%和48.60%),且滿足銹色棕櫚象生殖發(fā)育的營(yíng)養(yǎng)需求,為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供了規(guī);(biāo)準(zhǔn)化蟲源。2.嗅覺相關(guān)基因鑒定及序列分析;诨蚪M數(shù)據(jù),采用同源比對(duì)的方法共鑒定得到41個(gè)OBPs基因,11個(gè)CSPs基因,64個(gè)ORs基因,19個(gè)GRs基因,27個(gè)IRs基因,7個(gè)SNMPs基因。鑒定得到的OR、GR和IR數(shù)量均比赤擬谷盜和馬鈴薯甲蟲...

【文章頁數(shù)】:148 頁

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
1 引言
    1.1 昆蟲嗅覺基因研究進(jìn)展
        1.1.1 氣味結(jié)合蛋白(Odorant-binding Proteins,OBPs)
        1.1.2 化學(xué)感受蛋白(Chemosensory Proteins,CSPs)
        1.1.3 嗅覺受體(Odorant Receptors,ORs)
        1.1.4 味覺受體(Gustatory Receptors,GRs)
        1.1.5 離子型受體(Ionotropic Receptors,IRs)
        1.1.6 感受神經(jīng)元膜蛋白(Sensory Neuron Membrane Proteins,SNMPs)
    1.2 銹色棕櫚象人工飼養(yǎng)技術(shù)
    1.3 銹色棕櫚象嗅覺相關(guān)基因研究進(jìn)展
        1.3.1 銹色棕櫚象分布、寄主與危害
        1.3.2 銹色棕櫚象生活習(xí)性
        1.3.3 銹色棕櫚象嗅覺相關(guān)基因研究
    1.4 銹色棕櫚象聚集信息素誘捕技術(shù)及其它防治技術(shù)
        1.4.1 信息素誘捕技術(shù)
        1.4.2 化學(xué)防治技術(shù)
        1.4.3 生物防治技術(shù)
        1.4.4 輻射不育技術(shù)
    1.5 立項(xiàng)意義與總體思路
        1.5.1 立項(xiàng)意義
        1.5.2 總體思路
2 銹色棕櫚象人工飼養(yǎng)技術(shù)研究
    2.1 材料與方法
        2.1.1 供試蟲源
        2.1.2 銹色棕櫚象幼蟲半人工飼料各組分含量及配制方法
        2.1.3 銹色棕櫚象人工飼養(yǎng)方法
        2.1.4 數(shù)據(jù)處理與分析
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 三種半人工飼料飼養(yǎng)效果
        2.2.2 半人工飼料繼代飼養(yǎng)效果
    2.3 小結(jié)與討論
3 銹色棕櫚象嗅覺相關(guān)基因的鑒定及序列分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 基因序列數(shù)據(jù)庫(kù)
        3.1.2 化學(xué)感受器基因的鑒定及序列分析
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 氣味結(jié)合蛋白(OBPs)基因鑒定及序列分析
        3.2.2 化學(xué)感受蛋白(CSPs)基因鑒定及序列分析
        3.2.3 氣味受體(ORs)基因鑒定及序列分析
        3.2.4 味覺受體(GRs)基因鑒定及序列分析
        3.2.5 離子型受體(IRs)基因鑒定及序列分析
        3.2.6 感受神經(jīng)膜蛋白(SNMPs)基因鑒定及序列分析
    3.3 小結(jié)與討論
4 銹色棕櫚象嗅覺相關(guān)基因的組織表達(dá)譜分析
    4.1 材料與方法
        4.1.1 供試?yán)ハx
        4.1.2 主要試劑耗材及儀器設(shè)備
        4.1.3 銹色棕櫚象總RNA提取
        4.1.4 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序與分析
        4.1.5 組織表達(dá)特征分析
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 轉(zhuǎn)錄組測(cè)定及分析
        4.2.2 嗅覺相關(guān)基因的表達(dá)特征
        4.2.3 嗅覺相關(guān)基因的表達(dá)驗(yàn)證
    4.3 小結(jié)與討論
5 銹色棕櫚象化學(xué)感受基因沉默對(duì)其識(shí)別聚集信息素的影響
    5.1 材料與方法
        5.1.1 供試?yán)ハx
        5.1.2 主要試劑耗材及儀器設(shè)備
        5.1.3 化學(xué)感受基因的沉默
        5.1.4 dsRNA體外注射
        5.1.5 EAG和Y-型嗅覺儀測(cè)定
        5.1.6 數(shù)據(jù)處理與分析
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 RNAi后對(duì)化學(xué)感受基因表達(dá)水平的影響
        5.2.2 RNAi后對(duì)氣味化合物的行為反應(yīng)
    5.3 小結(jié)與討論
6 銹色棕櫚象聚集信息素野外誘捕技術(shù)及效果評(píng)價(jià)
    6.1 材料與方法
        6.1.1 試驗(yàn)地概況
        6.1.2 試驗(yàn)材料
        6.1.3 研究方法
        6.1.4 數(shù)據(jù)處理與分析
    6.2 結(jié)果與分析
        6.2.1 誘捕條件對(duì)銹色棕櫚象聚集信息素誘捕效果的影響
        6.2.2 聚集信息素誘捕到的銹色棕櫚象雌成蟲壽命和生殖力
    6.3 小結(jié)與討論
7 結(jié)論與展望
    7.1 主要結(jié)論
    7.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    7.3 展望
參考文獻(xiàn)
附圖
    附圖1:銹色棕櫚象氣味結(jié)合蛋白Classic和 ABP II亞家族多序列比對(duì)
    附圖2:銹色棕櫚象氣味結(jié)合蛋白PlusC亞家族多序列比對(duì)
    附圖3:銹色棕櫚象氣味結(jié)合蛋白Minus C亞家族多序列比對(duì)
    附圖4:銹色棕櫚象化學(xué)感受蛋白多序列比對(duì)
    附圖5:銹色棕櫚象氣味受體蛋白多序列比對(duì)
    附圖6:銹色棕櫚象味覺受體蛋白多序列比對(duì)
    附圖7:銹色棕櫚象離子型受體蛋白多序列比對(duì)
    附圖8:銹色棕櫚象感覺神經(jīng)元膜蛋白多序列比對(duì)
個(gè)人簡(jiǎn)介
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
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致謝



本文編號(hào):3829497

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