銹色棕櫚象是危害棕櫚科植物的重大入侵害蟲之一,嚴重影響了我國熱帶生態(tài)建設和區(qū)域經(jīng)濟的發(fā)展。昆蟲嗅覺在寄主定位、生殖活動和躲避天敵中發(fā)揮著重要作用,而嗅覺基因是昆蟲嗅覺活動的分子基礎。因此,對其嗅覺感受機制和誘捕技術研究有利于提高銹色棕櫚象的綠色防控。本研究突破人工飼養(yǎng)難題,利用基因組和轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)鑒定出嗅覺相關基因,對其進行表達譜分析,明確了基因沉默對銹色棕櫚象識別聚集信息素的影響,摸清了聚集信息素林間誘捕條件、評價了誘捕效果。主要結果如下:1.人工飼養(yǎng)技術。研發(fā)出半人工飼料及飼養(yǎng)技術,以自然寄主大王棕和甘蔗為對照,連續(xù)飼養(yǎng)3代,半人工飼料飼養(yǎng)的幼蟲和蛹歷期(40.20 d和33.99 d)顯著低于對照組,幼蟲存活率(63.87%)顯著高于對照組(37.99%和48.60%),且滿足銹色棕櫚象生殖發(fā)育的營養(yǎng)需求,為后續(xù)實驗提供了規(guī)模化、標準化蟲源。2.嗅覺相關基因鑒定及序列分析�；诨蚪M數(shù)據(jù),采用同源比對的方法共鑒定得到41個OBPs基因,11個CSPs基因,64個ORs基因,19個GRs基因,27個IRs基因,7個SNMPs基因。鑒定得到的OR、GR和IR數(shù)量均比赤擬谷盜和馬鈴薯甲蟲...

【文章頁數(shù)】：148 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1 引言
    1.1 昆蟲嗅覺基因研究進展
        1.1.1 氣味結合蛋白(Odorant-binding Proteins,OBPs)
        1.1.2 化學感受蛋白(Chemosensory Proteins,CSPs)
        1.1.3 嗅覺受體(Odorant Receptors,ORs)
        1.1.4 味覺受體(Gustatory Receptors,GRs)
        1.1.5 離子型受體(Ionotropic Receptors,IRs)
        1.1.6 感受神經(jīng)元膜蛋白(Sensory Neuron Membrane Proteins,SNMPs)
    1.2 銹色棕櫚象人工飼養(yǎng)技術
    1.3 銹色棕櫚象嗅覺相關基因研究進展
        1.3.1 銹色棕櫚象分布、寄主與危害
        1.3.2 銹色棕櫚象生活習性
        1.3.3 銹色棕櫚象嗅覺相關基因研究
    1.4 銹色棕櫚象聚集信息素誘捕技術及其它防治技術
        1.4.1 信息素誘捕技術
        1.4.2 化學防治技術
        1.4.3 生物防治技術
        1.4.4 輻射不育技術
    1.5 立項意義與總體思路
        1.5.1 立項意義
        1.5.2 總體思路
2 銹色棕櫚象人工飼養(yǎng)技術研究
    2.1 材料與方法
        2.1.1 供試蟲源
        2.1.2 銹色棕櫚象幼蟲半人工飼料各組分含量及配制方法
        2.1.3 銹色棕櫚象人工飼養(yǎng)方法
        2.1.4 數(shù)據(jù)處理與分析
    2.2 結果與分析
        2.2.1 三種半人工飼料飼養(yǎng)效果
        2.2.2 半人工飼料繼代飼養(yǎng)效果
    2.3 小結與討論
3 銹色棕櫚象嗅覺相關基因的鑒定及序列分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 基因序列數(shù)據(jù)庫
        3.1.2 化學感受器基因的鑒定及序列分析
    3.2 結果與分析
        3.2.1 氣味結合蛋白(OBPs)基因鑒定及序列分析
        3.2.2 化學感受蛋白(CSPs)基因鑒定及序列分析
        3.2.3 氣味受體(ORs)基因鑒定及序列分析
        3.2.4 味覺受體(GRs)基因鑒定及序列分析
        3.2.5 離子型受體(IRs)基因鑒定及序列分析
        3.2.6 感受神經(jīng)膜蛋白(SNMPs)基因鑒定及序列分析
    3.3 小結與討論
4 銹色棕櫚象嗅覺相關基因的組織表達譜分析
    4.1 材料與方法
        4.1.1 供試昆蟲
        4.1.2 主要試劑耗材及儀器設備
        4.1.3 銹色棕櫚象總RNA提取
        4.1.4 轉(zhuǎn)錄組測序與分析
        4.1.5 組織表達特征分析
    4.2 結果與分析
        4.2.1 轉(zhuǎn)錄組測定及分析
        4.2.2 嗅覺相關基因的表達特征
        4.2.3 嗅覺相關基因的表達驗證
    4.3 小結與討論
5 銹色棕櫚象化學感受基因沉默對其識別聚集信息素的影響
    5.1 材料與方法
        5.1.1 供試昆蟲
        5.1.2 主要試劑耗材及儀器設備
        5.1.3 化學感受基因的沉默
        5.1.4 dsRNA體外注射
        5.1.5 EAG和Y-型嗅覺儀測定
        5.1.6 數(shù)據(jù)處理與分析
    5.2 結果與分析
        5.2.1 RNAi后對化學感受基因表達水平的影響
        5.2.2 RNAi后對氣味化合物的行為反應
    5.3 小結與討論
6 銹色棕櫚象聚集信息素野外誘捕技術及效果評價
    6.1 材料與方法
        6.1.1 試驗地概況
        6.1.2 試驗材料
        6.1.3 研究方法
        6.1.4 數(shù)據(jù)處理與分析
    6.2 結果與分析
        6.2.1 誘捕條件對銹色棕櫚象聚集信息素誘捕效果的影響
        6.2.2 聚集信息素誘捕到的銹色棕櫚象雌成蟲壽命和生殖力
    6.3 小結與討論
7 結論與展望
    7.1 主要結論
    7.2 創(chuàng)新點
    7.3 展望
參考文獻
附圖
    附圖1:銹色棕櫚象氣味結合蛋白Classic和 ABP II亞家族多序列比對
    附圖2:銹色棕櫚象氣味結合蛋白PlusC亞家族多序列比對
    附圖3:銹色棕櫚象氣味結合蛋白Minus C亞家族多序列比對
    附圖4:銹色棕櫚象化學感受蛋白多序列比對
    附圖5:銹色棕櫚象氣味受體蛋白多序列比對
    附圖6:銹色棕櫚象味覺受體蛋白多序列比對
    附圖7:銹色棕櫚象離子型受體蛋白多序列比對
    附圖8:銹色棕櫚象感覺神經(jīng)元膜蛋白多序列比對
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導師簡介
在讀期間獲得成果目錄清單
致謝



本文編號：3829497