發(fā)布時(shí)間：2023-05-14 20:35

　　化療是目前癌癥治療中最為有效的三大傳統(tǒng)治療手段之一,其中,金屬鉑類化合物是目前應(yīng)用最廣泛的一類化療藥物,在臨床中參與一半以上的癌癥治療。然而,金屬鉑類化合物由于缺乏選擇性,在發(fā)揮抗腫瘤作用的同時(shí),對(duì)正常組織或器官產(chǎn)生較大的毒副作用;同時(shí),溶解度低、血液循環(huán)時(shí)間短、易被代謝等問題導(dǎo)致其生物利用率較低;更為嚴(yán)重的是,先天或后天因多次化療產(chǎn)生的耐藥性,極大地限制了鉑類藥物的治療效果。作為一種能從遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)上治愈疾病的新興技術(shù),基因療法在癌癥治療中發(fā)揮著越來越重要的作用。相比于化療藥物,基因藥物靶點(diǎn)明確、選擇性好、能夠特異性調(diào)控各種致病基因的表達(dá),且無耐藥性。因此,針對(duì)腫瘤治療中的耐藥性和異質(zhì)性等問題,通過聯(lián)合基因治療和鉑藥化療,在基因水平調(diào)控癌細(xì)胞增殖狀態(tài)的同時(shí)聯(lián)合化療藥物,具有良好的臨床應(yīng)用前景�？紤]到小分子鉑藥用于化療所面臨的問題以及基因藥物在體內(nèi)循環(huán)過程中易被降解、清除等不利因素,通過簡(jiǎn)單的設(shè)計(jì)制備鉑藥和基因藥物的共遞送系統(tǒng)用于實(shí)現(xiàn)化療和基因治療的協(xié)同作用具有重要意義。近年來,納米藥物遞送系統(tǒng)已在基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用中展現(xiàn)出諸多優(yōu)勢(shì),如改善藥物溶解性、延長(zhǎng)藥物血液循環(huán)時(shí)間、增加靶向部位...

【文章頁數(shù)】：175 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 癌癥治療
        1.1.1 鉑藥化療
        1.1.2 基因治療
        1.1.3 聯(lián)合鉑藥化療和基因治療
    1.2 聯(lián)合治療納米遞送載體
        1.2.1 無機(jī)納米載體
        1.2.2 高分子納米載體
        1.2.3 其它載體
    1.3 本論文選題依據(jù)和研究?jī)?nèi)容
第二章 含鉑聚前藥納米載體用于光控基因遞送及協(xié)同逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥性
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料及測(cè)試方法
        2.2.1 主要藥品及化學(xué)試劑
        2.2.2 主要生化試劑
        2.2.3 測(cè)試儀器及方法
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 四價(jià)光敏鉑trans,trans,trans-[Pt(N₃)₂(OH)₂(py)(NH₃)] (Pt(Ⅳ)的合成
        2.3.2 光敏鉑前藥骨架的陽離子聚合物(PtCP)的合成
        2.3.3 合成羅丹明B(RhB)標(biāo)記的PtCP (RhB-PtCP)
        2.3.4 端氨基聚乙二醇mPEG_2k-NH₂的合成
        2.3.5 合成聚乙二醇接枝的透明質(zhì)酸(HA-PEG,HP)
        2.3.6 光源及光照條件
        2.3.7 光響應(yīng)主鏈含鉑陽離子聚合物納米粒(NP_PtCP)的制備及表征
        2.3.8 PtCP的緩沖能力
        2.3.9 NP₍PtCP/si(c-fos))的制備及表征
        2.3.10 透明質(zhì)酸遮蔽的復(fù)合納米粒CNP₍PtCP/si(c-fos))的制備及表征
        2.3.11 抗反離子能力
        2.3.12 CNP₍PtCP/si(c-fos))的穩(wěn)定性
        2.3.13 Pt(Ⅳ)對(duì)基因的安全性
        2.3.14 CNP₍PtCP/si(c-fos))的光敏感性
        2.3.15 檢測(cè)疊氮自由基(N3
·)
        2.3.16 疊氮自由基(N3
·)對(duì)基因的安全性
        2.3.17 Pt及si(c-fos)的光響應(yīng)性釋放
        2.3.18 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.3.19 NP₍PtCP/si(c-fos))及CNP₍PtCP/si(c-fos))的細(xì)胞內(nèi)吞比較
        2.3.20 疊氮自由基(N3·)誘導(dǎo)溶酶體破裂
        2.3.21 光控溶酶體逃逸及基因卸載
        2.3.22 細(xì)胞毒性評(píng)價(jià)
        2.3.23 聯(lián)合用藥指數(shù)(Combination Index (CI))
        2.3.24 細(xì)胞凋亡
        2.3.25 Western blotting分析
        2.3.26 細(xì)胞Pt內(nèi)吞
        2.3.27 確立腫瘤模型
        2.3.28 Pt的體內(nèi)分布
        2.3.29 抑瘤實(shí)驗(yàn)
        2.3.30 腫瘤組織氧化型自由基檢測(cè)及腫瘤細(xì)胞溶酶體破裂
        2.3.31 血常規(guī)及生化指標(biāo)分析
        2.3.32 組織學(xué)及免疫熒光分析
        2.3.33 TUNEL檢測(cè)
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 四價(jià)光敏鉑前藥Pt(Ⅳ)的合成
        2.4.2 PtCP的合成
        2.4.3 mPEG_2k-NH₂的合成
        2.4.4 聚乙二醇接枝的透明質(zhì)酸(HP)的合成
        2.4.5 NP_PtCP,NP₍PtCP/si(c-fos))及CNP_PtCP/sic-fos)的制備及表征
        2.4.6 CNP₍PtCP/si(c-fos))的穩(wěn)定性
        2.4.7 Pt(Ⅳ)對(duì)基因的安全性分析
        2.4.8 Pt(Ⅳ)和PtCP的光響應(yīng)性
        2.4.9 CNP₍PtCP/si(c-fos))的光敏性
        2.4.10 CNP₍PtCP/si(c-fos))的靶向性
        2.4.11 疊氮自由基(N3·)的產(chǎn)生
        2.4.12 N3
·的安全性
        2.4.13 N3
·輔助溶酶體逃逸及光控基因卸載
        2.4.14 CNP₍PtCP/si(c-fos))的體外抗癌效果評(píng)價(jià)
        2.4.15 CNP₍PtCP/si(c-fos))的抗癌機(jī)理分析
        2.4.16 細(xì)胞凋亡檢測(cè)
        2.4.17 動(dòng)物水平抑瘤實(shí)驗(yàn)
        2.4.18 血液生化指標(biāo)及H&E染色
        2.4.19 機(jī)制研究
    2.5 本章結(jié)論
第三章 近紅外光激活的多模式成像診療系統(tǒng)用于癌癥聯(lián)合治療
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料及測(cè)試方法
        3.2.1 主要藥品及化學(xué)試劑
        3.2.2 主要生化試劑
        3.2.3 測(cè)試儀器及方法
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 四價(jià)光敏鉑trans,trans,trans-[Pt(N₃)₂(OH)₂(py)(NH₃)] (Pt(Ⅳ)的合成
        3.3.2 光敏鉑前藥骨架的聚合物(PtP)的合成
        3.3.3 上轉(zhuǎn)換納米粒(UCNP)的制備及表征
        3.3.4 UCNP@Pt的制備及表征
        3.3.5 UCNP@Pt@siRNA的制備及表征
        3.3.6 光源
        3.3.7 UCNP@Pt@siRNA的近紅外光響應(yīng)性
        3.3.8 UCNP@Pt@siRNA的近紅外光響應(yīng)性釋放
        3.3.9 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.3.10 UCNP@Pt@siRNA的細(xì)胞內(nèi)吞
        3.3.11 細(xì)胞毒性評(píng)價(jià)
        3.3.12 細(xì)胞凋亡
        3.3.13 Western blotting分析
        3.3.14 確立腫瘤模型
        3.3.15 多模式成像
        3.3.16 抑瘤實(shí)驗(yàn)
        3.3.17 血常規(guī)及生化指標(biāo)分析
        3.3.18 組織學(xué)及免疫熒光分析
        3.3.19 TUNEL檢測(cè)
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 Pt(Ⅳ)的合成
        3.4.2 PPt的合成
        3.4.3 UCNP@Pt@siRNA的制備及表征
        3.4.4 UCNP@Pt@siRNA的光敏感性
        3.4.5 UCNP@Pt@siRNA的細(xì)胞內(nèi)吞
        3.4.6 UCNP@Pt@siPlk1的體外抗癌效果評(píng)價(jià)
        3.4.7 MR/CT/UCL三模式成像
        3.4.8 動(dòng)物水平抑瘤實(shí)驗(yàn)
        3.4.9 血液生化指標(biāo)及H&E染色
        3.4.10 機(jī)制研究
    3.5 本章結(jié)論
第四章 鏈消除聚鉑高分子用于高效CRISPR/Cas9基因編輯-化療協(xié)同治療
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料及測(cè)試方法
        4.2.1 主要藥品及化學(xué)試劑
        4.2.2 主要生化試劑
        4.2.3 測(cè)試儀器及方法
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 四價(jià)鉑前藥cis,cis,trans-[Pt(Cl)₂(N₃)(OH)₂][Pt(Ⅳ)]的合成
        4.3.2 鏈消除聚鉑高分子(CSPt)的制備
        4.3.3 納米粒NP_CSPt的制備與表征
        4.3.4 NP_CSPt還原電勢(shì)測(cè)定
        4.3.5 NP_CSPt/pNC的制備及表征
        4.3.6 NP_CSPt和NP_CSPt/pNC的穩(wěn)定性比較
        4.3.7 NP_CSPt和NP_CSPt/pNC的還原敏感性
        4.3.8 NP_CSPt/pNC中Pt及pNC的響應(yīng)性釋放
        4.3.9 細(xì)胞培養(yǎng)
        4.3.10 細(xì)胞內(nèi)吞
        4.3.11 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        4.3.12 細(xì)胞毒性評(píng)價(jià)
        4.3.13 細(xì)胞凋亡
        4.3.14 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
        4.3.15 細(xì)胞增殖分析
        4.3.16 確立腫瘤模型
        4.3.17 抑瘤實(shí)驗(yàn)
        4.3.18 血常規(guī)及生化指標(biāo)分析
        4.3.19 組織學(xué)及免疫熒光分析
        4.3.20 TUNEL檢測(cè)
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 Pt(Ⅳ)的合成
        4.4.2 CSPt的合成
        4.4.3 NP_CSPt和NP_CSPt/pNC的制備及表征
        4.4.4 NP_CSPt和NP_CSPt/pNC的還原敏感性
        4.4.5 溶酶體逃逸和基因卸載
        4.4.6 NP_CSPt/pEZH2高效的基因編輯能力
        4.4.7 NP_CSPt/pEZH2的體外抗癌效果及機(jī)理
        4.4.8 動(dòng)物水平抑瘤實(shí)驗(yàn)
        4.4.9 血液生化指標(biāo)及H&E染色
        4.4.10 機(jī)制研究
    4.5 本章結(jié)論
全文總結(jié)及展望
參考文獻(xiàn)
致謝
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與取得的其他研究成果



本文編號(hào)：3817719

boshi