杜仲是我國傳統(tǒng)中藥材,具有調(diào)節(jié)血壓抗癌及抗炎等多種藥理活性,開發(fā)價值極高。同時杜仲膠具有極強(qiáng)的耐酸、耐腐蝕及耐疲勞性能,是很好的天然橡膠資源。油菜素內(nèi)酯是一種重要的植物激素能調(diào)節(jié)植物多種生理和發(fā)育過程如細(xì)胞伸長和分裂,花粉育性,光形態(tài),維管束分化和抗逆性等。有關(guān)油菜素內(nèi)酯信號轉(zhuǎn)導(dǎo)研究在擬南芥、油菜、水稻及番茄等多種草本植物中己取得重要進(jìn)展,但在多年生木本植物中僅在楊樹中有少量研究。本研究以杜仲為材料,克隆杜仲油菜素內(nèi)酯受體蛋白編碼基因(EuBRI1),并對該基因進(jìn)行生物信息學(xué)分析,以及在杜仲組織器官中的表達(dá)特征進(jìn)行分析。并構(gòu)建了植物過表達(dá)載體pSH-35S-EuBRI1,遺傳轉(zhuǎn)化擬南芥Ws2及擬南芥BR受體蛋白突變體(bri1-5),以轉(zhuǎn)基因株系驗證分析EuBRI1基因的功能。主要研究結(jié)果如下:1杜仲EuBRI1基因克隆及生物信息學(xué)分析本研究在研究院建立的杜仲轉(zhuǎn)錄組測序注釋數(shù)據(jù)庫的基礎(chǔ)上,利用PCR技術(shù)以杜仲DNA及cDNA為模板分別克隆了一段3612 bp的基因序列,測序結(jié)果顯示兩條序列完全一致,命名為EuBRI1。分析表明,EuBRI1具有完整的開放閱讀框(Open Reading ...

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圖1.1杜仲DNADNAofEucommiaulmRNA進(jìn)行提取，條帶清晰可見，無0均在2.0左右，序?qū)NA進(jìn)行反得到明顯的目的條

圖1.1杜仲DNAe1DNAofEucommiaulmoid仲皮RNA進(jìn)行提取，電18s條帶清晰可見，無降解280均在2.0左右，表明程序?qū)NA進(jìn)行反轉(zhuǎn)，擴(kuò)增得到明顯的目的條帶

圖1.3EuBRI1基因擴(kuò)增結(jié)果DNA5000,1:目的片段；B:M:DLDNA5000,1:Figure1.3TheDNAfragmentamplificationofEuDIRA5000,1:Targetgenefragment;....

貴州大學(xué)2018屆碩士研究生學(xué)位論文圖1.3EuBRI1基因擴(kuò)增結(jié)果注:A:M:DLDNA5000,1:目的片段；B:M:DLDNA5000,1:以cDNA為模板Figure1.3TheDNAfragmentamplificati....

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