小麥(Triticum aestivum L.)是我國最重要的糧食作物之一。小麥條銹菌(Puccinia striiformis f.sp.tritici)是活體營養(yǎng)專性寄生真菌,其引起的小麥條銹病是威脅小麥生產(chǎn)及糧食安全的流行性真菌病害。小麥條銹菌變異頻繁且發(fā)生迅速的特點是導(dǎo)致抗病品種抗性不斷喪失,引發(fā)病害不斷流行的主要原因。由于不能離體培養(yǎng),缺乏可靠轉(zhuǎn)化體系也使得條銹菌致病基因功能研究相對滯后。幾丁質(zhì)是構(gòu)成真菌細(xì)胞壁的主要物質(zhì)及關(guān)鍵組件,在自然界中含量巨大具有許多功能,其中包括在細(xì)胞分裂與極性生長期間保持細(xì)胞的機(jī)械穩(wěn)定性,并且在侵染過程中初步接觸寄主。絕大多數(shù)真菌幾丁質(zhì)酶屬于GH18糖苷水解酶超家族并且在多個生長時期包括細(xì)胞壁降解和修飾的過程中發(fā)揮作用,例如孢子萌發(fā),尖端生長和菌絲分枝,孢子分化,自溶和重寄生。為了抵御病原體,植物已經(jīng)形成了復(fù)雜的免疫系統(tǒng),包括識別病原體相關(guān)分子模式的質(zhì)膜受體,例如來源于真菌細(xì)胞壁的幾丁質(zhì),植物會在接觸后產(chǎn)生防御反應(yīng)。因此,對小麥識別病原體相關(guān)分子模式的研究對小麥條銹病的致病機(jī)理起著至關(guān)重要的作用。根據(jù)本實驗室的基因組與轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),發(fā)現(xiàn)幾丁質(zhì)酶基因P...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 小麥條銹病概況
        1.1.1 小麥條銹菌生活史
    1.2 小麥品種抗性及病原菌變異
        1.2.1 小麥條銹菌變異
        1.2.2 小麥品種抗病性喪失
    1.3 植物對病原菌的免疫機(jī)制
    1.4 幾丁質(zhì)與幾丁質(zhì)酶
        1.4.1 幾丁質(zhì)
        1.4.2 幾丁質(zhì)酶的酶學(xué)特性
        1.4.3 幾丁質(zhì)酶的分布定位
        1.4.4 幾丁質(zhì)酶的分類
    1.5 真菌幾丁質(zhì)酶的生物學(xué)作用
        1.5.1 酵母幾丁質(zhì)酶的功能研究
        1.5.2 絲狀真菌幾丁質(zhì)酶的功能研究
    1.6 真菌幾丁質(zhì)酶在植物免疫機(jī)制中的作用
    1.7 本研究的目的和意義
第二章 小麥條銹菌幾丁質(zhì)酶基因Pst₂3943 功能分析
    2.1 材料
        2.1.1 試驗材料
        2.1.2 分子生物學(xué)試劑
        2.1.3 化學(xué)試劑
        2.1.4 主要儀器
    2.2 試驗方法
        2.2.1 小麥條銹菌的繁殖與收集
        2.2.2 小麥條銹菌夏孢子及接種條銹菌葉片總RNA的提取及純化
        2.2.3 生物信息學(xué)分析Pst₂3943 基因
        2.2.4 Pst₂3943 基因的克隆
        2.2.5 Real-time PCR分析
        2.2.6 VIGS介導(dǎo)的基因沉默實驗
        2.2.7 原生質(zhì)體定位
        2.2.8 二硝基水楊酸(DNS)比色法測定還原糖
    2.3 試驗結(jié)果
        2.3.1 生物信息學(xué)分析
        2.3.2 幾丁質(zhì)酶基因Pst₂3943 的生化功能分析
        2.3.3 Pst₂3943在cDNA內(nèi)的表達(dá)量
        2.3.4 Pst₂3943 的原生質(zhì)體定位分析
        2.3.5 VIGS沉默Pst₂3943 的結(jié)果分析
    2.4 結(jié)論與討論
第三章 展望
附錄
    附錄一 引物序列
參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷



本文編號：3817983