膿毒癥(sepsis)是針對感染的宿主免疫反應(yīng)失調(diào)導(dǎo)致危及生命的器官功能障礙,是目前世界范圍內(nèi)感染致死最主要的原因。全世界范圍內(nèi)每年超過3000萬人罹患膿毒癥,其中多達四分之一甚至更多的人死亡。膿毒癥的治療給全球醫(yī)療衛(wèi)生事業(yè)帶來了巨大的負擔(dān),尤其是低收入和中收入國家。目前膿毒癥治療主要是使用抗生素和支持療法,但這些療法在膿毒癥引起全身炎癥和器官功能障礙中的治療效果有限。因此,迫切需要臨床和科研工作者探索和發(fā)展更為有效的治療手段。在過去的十幾年中,細胞療法已成為膿毒癥治療新希望之一。間充質(zhì)干細胞(MSC)是廣泛存在于外周血、骨髓、脂肪、臍帶、臍帶血、胎盤等幾乎所有組織基質(zhì)的成體干細胞,具有快速增殖、高分化潛能和自我更新復(fù)制的能力,可誘導(dǎo)分化為人體多種細胞,包括成骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞、肌肉細胞等。MSC最顯著的特性在于其具有較強的免疫調(diào)節(jié)作用,且來源豐富、易于分離和體外擴增,使其成為細胞治療的理想種子細胞。近年來,多項試驗研究表明MSC能夠調(diào)節(jié)膿毒癥的病理生理過程,而基于MSC的細胞療法是膿毒癥治療的新手段。其主要機制在于MSC作為免疫反應(yīng)的強效調(diào)節(jié)劑,可以使固有和適應(yīng)性免疫應(yīng)答恢復(fù)...

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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縮略語表
中文摘要
Abstract
前言
文獻回顧
第一部分 小鼠骨髓來源的間充質(zhì)干細胞分離及 cxcr2 基因修飾在LPS 所致膿毒癥動物模型中的作用研究
    1 材料
        1.1 實驗動物
        1.2 細胞與質(zhì)粒
        1.3 實驗試劑
        1.4 實驗耗材
        1.5 實驗儀器
    2 方法
        2.1 小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞分離培養(yǎng)鑒定
        2.2 pLenti-cxcr2-GZ慢病毒載體構(gòu)建
        2.3 CXCR2 慢病毒包裝
        2.4 pLenti-cxcr2-GZ穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞構(gòu)建、篩選及鑒定
        2.5 Transwell實驗檢測CXCR2-BMSC遷移能力
        2.6 Real-time PCR檢測LPS所致的膿毒癥模型中CXC型趨化因子的表達
        2.7 LPS所致的膿毒癥模型的建立及CXCR2-BMSC移植
        2.8 組織學(xué)檢測
        2.9 Elisa檢測血清炎性因子
        2.10 肺干濕比變化
        2.11 小動物活體成像檢測CXCR2-BMSC體內(nèi)遷移能力
        2.12 統(tǒng)計學(xué)方法
    3 結(jié)果
        3.1 分離小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的鑒定結(jié)果
        3.2 pLenti-cxcr2-GZ慢病毒載體構(gòu)建結(jié)果
        3.3 CXCR2 慢病毒包裝及表達鑒定結(jié)果
        3.4 CXCR2-GZ穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞構(gòu)建、篩選及鑒定結(jié)果
        3.5 Transwell實驗檢測CXCR2-BMSC遷移能力的結(jié)果
        3.6 LPS所致的膿毒癥模型中CXC型趨化因子mRNA表達水平檢測結(jié)果
        3.7 CXCR2-BMSC移植改善膿毒癥后肺組織損傷的效果評價
        3.8 CXCR2-BMSC移植對膿毒癥小鼠炎性因子水平的影響結(jié)果
        3.9 CXCR2-BMSC移植對肺干濕比變化的檢測結(jié)果
        3.10 CXCR2-BMSC體內(nèi)遷移能力的檢測結(jié)果
    4 討論
第二部分 人臍帶來源的間充質(zhì)干細胞分離及 cxcr2 基因修飾在LPS 所致膿毒癥動物模型中的作用研究
    1 材料
        1.1 實驗動物
        1.2 細胞與質(zhì)粒
        1.3 實驗試劑
        1.4 實驗儀器
        1.5 實驗耗材
    2 方法
        2.1 人臍帶間充質(zhì)干細胞分離培養(yǎng)鑒定
        2.2 pLenti-cxcr2-GZ轉(zhuǎn)染的人臍帶間充質(zhì)干細胞構(gòu)建及鑒定
        2.3 Transwell實驗檢測CXCR2-hUCMSC遷移能力
        2.4 LPS所致的膿毒癥模型的建立及CXCR2-hUCMSC移植
        2.5 組織學(xué)檢測
        2.6 Elisa檢測血清炎性因子
        2.7 肺干濕比變化
        2.8 小動物活體成像檢測CXCR2-hUCMSC體內(nèi)遷移能力
        2.9 統(tǒng)計學(xué)方法
    3 結(jié)果
        3.1 分離人臍帶間充質(zhì)干細胞及鑒定結(jié)果
        3.2 pLenti-cxcr2-GZ轉(zhuǎn)染的人臍帶間充質(zhì)干細胞構(gòu)建及鑒定結(jié)果
        3.3 Transwell實驗檢測CXCR2-hUCMSC遷移能力的結(jié)果
        3.4 CXCR2-hUCMSC移植后膿毒癥小鼠HE染色結(jié)果
        3.5 Elisa檢測CXCR2-hUCMSC移植后小鼠血清炎性因子結(jié)果
        3.6 CXCR2-hUCMSC移植后膿毒癥小鼠肺干濕比變化結(jié)果
        3.7 小動物活體成像檢測CXCR2-hUCMSC體內(nèi)遷移能力變化結(jié)果
    4 討論
小結(jié)
參考文獻
個人簡歷和研究成果
致謝



本文編號：3806861