膿毒癥(sepsis)是針對(duì)感染的宿主免疫反應(yīng)失調(diào)導(dǎo)致危及生命的器官功能障礙,是目前世界范圍內(nèi)感染致死最主要的原因。全世界范圍內(nèi)每年超過(guò)3000萬(wàn)人罹患膿毒癥,其中多達(dá)四分之一甚至更多的人死亡。膿毒癥的治療給全球醫(yī)療衛(wèi)生事業(yè)帶來(lái)了巨大的負(fù)擔(dān),尤其是低收入和中收入國(guó)家。目前膿毒癥治療主要是使用抗生素和支持療法,但這些療法在膿毒癥引起全身炎癥和器官功能障礙中的治療效果有限。因此,迫切需要臨床和科研工作者探索和發(fā)展更為有效的治療手段。在過(guò)去的十幾年中,細(xì)胞療法已成為膿毒癥治療新希望之一。間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)是廣泛存在于外周血、骨髓、脂肪、臍帶、臍帶血、胎盤等幾乎所有組織基質(zhì)的成體干細(xì)胞,具有快速增殖、高分化潛能和自我更新復(fù)制的能力,可誘導(dǎo)分化為人體多種細(xì)胞,包括成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、肌肉細(xì)胞等。MSC最顯著的特性在于其具有較強(qiáng)的免疫調(diào)節(jié)作用,且來(lái)源豐富、易于分離和體外擴(kuò)增,使其成為細(xì)胞治療的理想種子細(xì)胞。近年來(lái),多項(xiàng)試驗(yàn)研究表明MSC能夠調(diào)節(jié)膿毒癥的病理生理過(guò)程,而基于MSC的細(xì)胞療法是膿毒癥治療的新手段。其主要機(jī)制在于MSC作為免疫反應(yīng)的強(qiáng)效調(diào)節(jié)劑,可以使固有和適應(yīng)性免疫應(yīng)答恢復(fù)...

【文章頁(yè)數(shù)】：83 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
縮略語(yǔ)表
中文摘要
Abstract
前言
文獻(xiàn)回顧
第一部分 小鼠骨髓來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞分離及 cxcr2 基因修飾在LPS 所致膿毒癥動(dòng)物模型中的作用研究
    1 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 細(xì)胞與質(zhì)粒
        1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.4 實(shí)驗(yàn)耗材
        1.5 實(shí)驗(yàn)儀器
    2 方法
        2.1 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)鑒定
        2.2 pLenti-cxcr2-GZ慢病毒載體構(gòu)建
        2.3 CXCR2 慢病毒包裝
        2.4 pLenti-cxcr2-GZ穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞構(gòu)建、篩選及鑒定
        2.5 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CXCR2-BMSC遷移能力
        2.6 Real-time PCR檢測(cè)LPS所致的膿毒癥模型中CXC型趨化因子的表達(dá)
        2.7 LPS所致的膿毒癥模型的建立及CXCR2-BMSC移植
        2.8 組織學(xué)檢測(cè)
        2.9 Elisa檢測(cè)血清炎性因子
        2.10 肺干濕比變化
        2.11 小動(dòng)物活體成像檢測(cè)CXCR2-BMSC體內(nèi)遷移能力
        2.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    3 結(jié)果
        3.1 分離小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的鑒定結(jié)果
        3.2 pLenti-cxcr2-GZ慢病毒載體構(gòu)建結(jié)果
        3.3 CXCR2 慢病毒包裝及表達(dá)鑒定結(jié)果
        3.4 CXCR2-GZ穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞構(gòu)建、篩選及鑒定結(jié)果
        3.5 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CXCR2-BMSC遷移能力的結(jié)果
        3.6 LPS所致的膿毒癥模型中CXC型趨化因子mRNA表達(dá)水平檢測(cè)結(jié)果
        3.7 CXCR2-BMSC移植改善膿毒癥后肺組織損傷的效果評(píng)價(jià)
        3.8 CXCR2-BMSC移植對(duì)膿毒癥小鼠炎性因子水平的影響結(jié)果
        3.9 CXCR2-BMSC移植對(duì)肺干濕比變化的檢測(cè)結(jié)果
        3.10 CXCR2-BMSC體內(nèi)遷移能力的檢測(cè)結(jié)果
    4 討論
第二部分 人臍帶來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞分離及 cxcr2 基因修飾在LPS 所致膿毒癥動(dòng)物模型中的作用研究
    1 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 細(xì)胞與質(zhì)粒
        1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.4 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.5 實(shí)驗(yàn)耗材
    2 方法
        2.1 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)鑒定
        2.2 pLenti-cxcr2-GZ轉(zhuǎn)染的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞構(gòu)建及鑒定
        2.3 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CXCR2-hUCMSC遷移能力
        2.4 LPS所致的膿毒癥模型的建立及CXCR2-hUCMSC移植
        2.5 組織學(xué)檢測(cè)
        2.6 Elisa檢測(cè)血清炎性因子
        2.7 肺干濕比變化
        2.8 小動(dòng)物活體成像檢測(cè)CXCR2-hUCMSC體內(nèi)遷移能力
        2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    3 結(jié)果
        3.1 分離人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞及鑒定結(jié)果
        3.2 pLenti-cxcr2-GZ轉(zhuǎn)染的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞構(gòu)建及鑒定結(jié)果
        3.3 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CXCR2-hUCMSC遷移能力的結(jié)果
        3.4 CXCR2-hUCMSC移植后膿毒癥小鼠HE染色結(jié)果
        3.5 Elisa檢測(cè)CXCR2-hUCMSC移植后小鼠血清炎性因子結(jié)果
        3.6 CXCR2-hUCMSC移植后膿毒癥小鼠肺干濕比變化結(jié)果
        3.7 小動(dòng)物活體成像檢測(cè)CXCR2-hUCMSC體內(nèi)遷移能力變化結(jié)果
    4 討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷和研究成果
致謝



本文編號(hào)：3806861