豆科植物與根瘤菌的互利共生關系對農業(yè)發(fā)展和生態(tài)保護都十分有利,研究豆科植物共生相關基因的功能能夠更好地利用這種互利互惠關系,促進健康生態(tài)農業(yè)的發(fā)展。本實驗對蒺藜苜蓿中TCTP基因進行了功能研究,進一步揭示了該基因在共生結瘤中的分子機制。翻譯控制腫瘤蛋白(Translationally controlled tumor protein,TCTP)是一類在真核生物體內廣泛存在且高度保守的蛋白,在植物生長發(fā)育各個階段都發(fā)揮著重要作用。實驗室前期對模式豆科植物蒺藜苜蓿中的TCTP同源基因MTR₁g083380進行了亞細胞定位、RNAi和基因過量表達等研究,證實其在蒺藜苜蓿與根瘤菌共生互作中發(fā)揮作用。為進一步了解TCTP基因在豆科植物共生結瘤中的具體功能,本研究進一步對該基因進行了時空表達及啟動子組織定位分析,同時通過酵母雙雜交實驗、雙分子熒光互補實驗研究其可能的互作蛋白。結果表明,MTR₁g083380基因在蒺藜苜蓿根部不同時期均有表達,其中接種根瘤菌后第18 d表達量最高,而不接種根瘤菌的情況下第28d的表達量達到最高;在接種根瘤菌后不同組織中的表...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1.1 豆科植物與共生固氮
        1.1.1 豆科植物與根瘤菌共生體系
        1.1.2 根瘤的形成和類型
        1.1.3 根瘤形成過程及其分子機制
        1.1.4 植物激素在根瘤形成中的作用
    1.2 翻譯控制腫瘤蛋白TCTP的研究現(xiàn)狀
        1.2.1 TCTP基因的結構特征
        1.2.2 翻譯控制腫瘤蛋白在植物中的研究現(xiàn)狀
    1.3 研究目的及意義
    1.4 技術路線
第二章 蒺藜苜蓿TCTP基因的表達特征分析
    2.1 前言
    2.2 試驗材料和方法
        2.2.1 試驗材料和試劑
        2.2.2 系統(tǒng)發(fā)育分析
        2.2.3 植物種植和取樣
        2.2.4 基因的定量分析
        2.2.5 啟動子融合表達載體的構建
        2.2.6 GUS染色與觀察
    2.3 結果與分析
        2.3.1 系統(tǒng)發(fā)育分析
        2.3.2 Mt TCTP時空表達分析
        2.3.3 Mt TCTP啟動子的組織化學定位
    2.4 小結與討論
第三章 蒺藜苜蓿TCTP互作蛋白的篩選
    3.1 前言
    3.2 實驗材料和方法
        3.2.1 實驗材料
        3.2.2 試劑與配方、儀器
        3.2.3 酵母雙雜交載體構建及互作實驗
        3.2.4 雙分子熒光互補載體構建及實驗
        3.2.5 雙分子熒光互補實驗
    3.3 結果與分析
        3.3.1 假定互作蛋白的篩選
        3.3.2 酵母雙雜交實驗
        3.3.3 雙分子熒光互補實驗
        3.3.4 MTR₁g079790 基因的時空表達分析
    3.4 小結
    3.5 討論
第四章 結論
參考文獻
附錄
致謝
個人簡歷



本文編號：3803709