豆科植物與根瘤菌的互利共生關(guān)系對(duì)農(nóng)業(yè)發(fā)展和生態(tài)保護(hù)都十分有利,研究豆科植物共生相關(guān)基因的功能能夠更好地利用這種互利互惠關(guān)系,促進(jìn)健康生態(tài)農(nóng)業(yè)的發(fā)展。本實(shí)驗(yàn)對(duì)蒺藜苜蓿中TCTP基因進(jìn)行了功能研究,進(jìn)一步揭示了該基因在共生結(jié)瘤中的分子機(jī)制。翻譯控制腫瘤蛋白(Translationally controlled tumor protein,TCTP)是一類在真核生物體內(nèi)廣泛存在且高度保守的蛋白,在植物生長發(fā)育各個(gè)階段都發(fā)揮著重要作用。實(shí)驗(yàn)室前期對(duì)模式豆科植物蒺藜苜蓿中的TCTP同源基因MTR₁g083380進(jìn)行了亞細(xì)胞定位、RNAi和基因過量表達(dá)等研究,證實(shí)其在蒺藜苜蓿與根瘤菌共生互作中發(fā)揮作用。為進(jìn)一步了解TCTP基因在豆科植物共生結(jié)瘤中的具體功能,本研究進(jìn)一步對(duì)該基因進(jìn)行了時(shí)空表達(dá)及啟動(dòng)子組織定位分析,同時(shí)通過酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)、雙分子熒光互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)研究其可能的互作蛋白。結(jié)果表明,MTR₁g083380基因在蒺藜苜蓿根部不同時(shí)期均有表達(dá),其中接種根瘤菌后第18 d表達(dá)量最高,而不接種根瘤菌的情況下第28d的表達(dá)量達(dá)到最高;在接種根瘤菌后不同組織中的表...

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 豆科植物與共生固氮
        1.1.1 豆科植物與根瘤菌共生體系
        1.1.2 根瘤的形成和類型
        1.1.3 根瘤形成過程及其分子機(jī)制
        1.1.4 植物激素在根瘤形成中的作用
    1.2 翻譯控制腫瘤蛋白TCTP的研究現(xiàn)狀
        1.2.1 TCTP基因的結(jié)構(gòu)特征
        1.2.2 翻譯控制腫瘤蛋白在植物中的研究現(xiàn)狀
    1.3 研究目的及意義
    1.4 技術(shù)路線
第二章 蒺藜苜蓿TCTP基因的表達(dá)特征分析
    2.1 前言
    2.2 試驗(yàn)材料和方法
        2.2.1 試驗(yàn)材料和試劑
        2.2.2 系統(tǒng)發(fā)育分析
        2.2.3 植物種植和取樣
        2.2.4 基因的定量分析
        2.2.5 啟動(dòng)子融合表達(dá)載體的構(gòu)建
        2.2.6 GUS染色與觀察
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 系統(tǒng)發(fā)育分析
        2.3.2 Mt TCTP時(shí)空表達(dá)分析
        2.3.3 Mt TCTP啟動(dòng)子的組織化學(xué)定位
    2.4 小結(jié)與討論
第三章 蒺藜苜蓿TCTP互作蛋白的篩選
    3.1 前言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料和方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.2 試劑與配方、儀器
        3.2.3 酵母雙雜交載體構(gòu)建及互作實(shí)驗(yàn)
        3.2.4 雙分子熒光互補(bǔ)載體構(gòu)建及實(shí)驗(yàn)
        3.2.5 雙分子熒光互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 假定互作蛋白的篩選
        3.3.2 酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)
        3.3.3 雙分子熒光互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)
        3.3.4 MTR₁g079790 基因的時(shí)空表達(dá)分析
    3.4 小結(jié)
    3.5 討論
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
個(gè)人簡歷



本文編號(hào)：3803709