武昌羅索線蟲(Romanomermis wuchangensis)是一種昆蟲病原索科線蟲,可主動侵染多種庫蚊和伊蚊的幼蟲(孑孓),寄生率即等于害蟲的死亡率,生物防治潛力極大。在武昌羅索線蟲整個生活史中,營養(yǎng)均來源于其寄生期吸取宿主血淋巴微環(huán)境中的營養(yǎng)物質(zhì),它的另一個特點(diǎn)是性別分化為營養(yǎng)決定型,即每一宿主體內(nèi)寄生的線蟲越少,每條線蟲在宿主體內(nèi)血淋巴中吸取的營養(yǎng)越多,越有可能發(fā)育為雌蟲,反之則為雄蟲。為探究昆蟲病原索科線蟲營養(yǎng)決定性別分化的分子機(jī)理,本課題組前期通過轉(zhuǎn)錄組測序并以秀麗線蟲(Caenorhabtditis elegans)為背景篩選出fox-1、tra-2、laf1、fem-1、tra-1、mab-3、mab-7、mab-5、gld-1、egl-4 等10個與性別分化和性腺發(fā)育相關(guān)的基因,并對其中的fox-1、tra-2、laf1、fem-1、tra-1、mab-3、mab-7等基因的功能進(jìn)行了初步研究,但對mab-5、gld-1、egl-4基因在武昌羅索線蟲性別分化過程中的作用仍認(rèn)識不足。本文通過觀察武昌羅索線蟲寄生期的生長狀況及停止喂食孑孓以探討其營養(yǎng)決定性別分化的關(guān)鍵期...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 武昌羅索線蟲及其宿主
        1.1.1 武昌羅索線蟲的生物學(xué)特性
        1.1.2 昆蟲病原索科線蟲研究進(jìn)展
        1.1.3 蚊子及其危害
    1.2 性別決定與性別分化
        1.2.1 基因決定型
        1.2.2 環(huán)境決定型
    1.3 研究的目的和意義
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 武昌羅索線蟲及其宿主
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 比較庫蚊和伊蚊對線蟲雌雄性比的影響
        2.2.2 寄生1-7天雌雄線蟲的體長、體寬
        2.2.3 禁止喂食孑孓對武昌羅索線蟲性比的影響
        2.2.4 雌雄線蟲不同發(fā)育期樣本的收集
        2.2.5 RNA的提取和cDNA的合成
        2.2.6 qRT-PCR實(shí)驗(yàn)
        2.2.7 dsRNA的合成
        2.2.8 RNAi干擾實(shí)驗(yàn)
3 結(jié)果與分析
    3.1 武昌羅索線蟲性別分化關(guān)鍵期的研究
        3.1.1 比較伊蚊和庫蚊對武昌羅索線蟲性比的影響
        3.1.2 感染強(qiáng)度對武昌羅索線蟲體長的影響
        3.1.3 武昌羅索線蟲寄生期1-7天雌雄蟲生長狀況
        3.1.4 寄生第3-5天禁止喂食孑孓對線蟲性比的影響
        3.1.5 禁止喂食孑孓對線蟲生長狀況的影響
    3.2 Rwugld-1、Rwumab-5、Rwuegl-4基因的表達(dá)及功能分析
        3.2.1 gld-1、mab-5、egl-4基因在線蟲不同發(fā)育期的表達(dá)模式
        3.2.2 敲降gld-1、mab-5、egl-4基因后對線蟲性比的影響
        3.2.3 干擾gld-1基因后對線蟲性別決定基因的影響
        3.2.4 干擾mab-5基因后對線蟲性別決定基因的影響
        3.2.5 干擾egl-4基因后對線蟲性別決定基因的影響
        3.2.6 干擾fox-1基因后對線蟲性別決定基因的影響
4 討論
    4.1 武昌羅索線營養(yǎng)決定性別分化關(guān)鍵期的初步探索
    4.2 gld-1、mab-5、egl-4在雌雄線蟲不同發(fā)育期的表達(dá)情況及功能分析
    4.3 干擾基因gld-1、mab-5、egl-4、fox-1后對性別決定基因的影響
    4.4 小結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：3802353