武昌羅索線蟲(Romanomermis wuchangensis)是一種昆蟲病原索科線蟲,可主動(dòng)侵染多種庫(kù)蚊和伊蚊的幼蟲(孑孓),寄生率即等于害蟲的死亡率,生物防治潛力極大。在武昌羅索線蟲整個(gè)生活史中,營(yíng)養(yǎng)均來源于其寄生期吸取宿主血淋巴微環(huán)境中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),它的另一個(gè)特點(diǎn)是性別分化為營(yíng)養(yǎng)決定型,即每一宿主體內(nèi)寄生的線蟲越少,每條線蟲在宿主體內(nèi)血淋巴中吸取的營(yíng)養(yǎng)越多,越有可能發(fā)育為雌蟲,反之則為雄蟲。為探究昆蟲病原索科線蟲營(yíng)養(yǎng)決定性別分化的分子機(jī)理,本課題組前期通過轉(zhuǎn)錄組測(cè)序并以秀麗線蟲(Caenorhabtditis elegans)為背景篩選出fox-1、tra-2、laf1、fem-1、tra-1、mab-3、mab-7、mab-5、gld-1、egl-4 等10個(gè)與性別分化和性腺發(fā)育相關(guān)的基因,并對(duì)其中的fox-1、tra-2、laf1、fem-1、tra-1、mab-3、mab-7等基因的功能進(jìn)行了初步研究,但對(duì)mab-5、gld-1、egl-4基因在武昌羅索線蟲性別分化過程中的作用仍認(rèn)識(shí)不足。本文通過觀察武昌羅索線蟲寄生期的生長(zhǎng)狀況及停止喂食孑孓以探討其營(yíng)養(yǎng)決定性別分化的關(guān)鍵期...

【文章頁(yè)數(shù)】：62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 武昌羅索線蟲及其宿主
        1.1.1 武昌羅索線蟲的生物學(xué)特性
        1.1.2 昆蟲病原索科線蟲研究進(jìn)展
        1.1.3 蚊子及其危害
    1.2 性別決定與性別分化
        1.2.1 基因決定型
        1.2.2 環(huán)境決定型
    1.3 研究的目的和意義
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 武昌羅索線蟲及其宿主
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 比較庫(kù)蚊和伊蚊對(duì)線蟲雌雄性比的影響
        2.2.2 寄生1-7天雌雄線蟲的體長(zhǎng)、體寬
        2.2.3 禁止喂食孑孓對(duì)武昌羅索線蟲性比的影響
        2.2.4 雌雄線蟲不同發(fā)育期樣本的收集
        2.2.5 RNA的提取和cDNA的合成
        2.2.6 qRT-PCR實(shí)驗(yàn)
        2.2.7 dsRNA的合成
        2.2.8 RNAi干擾實(shí)驗(yàn)
3 結(jié)果與分析
    3.1 武昌羅索線蟲性別分化關(guān)鍵期的研究
        3.1.1 比較伊蚊和庫(kù)蚊對(duì)武昌羅索線蟲性比的影響
        3.1.2 感染強(qiáng)度對(duì)武昌羅索線蟲體長(zhǎng)的影響
        3.1.3 武昌羅索線蟲寄生期1-7天雌雄蟲生長(zhǎng)狀況
        3.1.4 寄生第3-5天禁止喂食孑孓對(duì)線蟲性比的影響
        3.1.5 禁止喂食孑孓對(duì)線蟲生長(zhǎng)狀況的影響
    3.2 Rwugld-1、Rwumab-5、Rwuegl-4基因的表達(dá)及功能分析
        3.2.1 gld-1、mab-5、egl-4基因在線蟲不同發(fā)育期的表達(dá)模式
        3.2.2 敲降gld-1、mab-5、egl-4基因后對(duì)線蟲性比的影響
        3.2.3 干擾gld-1基因后對(duì)線蟲性別決定基因的影響
        3.2.4 干擾mab-5基因后對(duì)線蟲性別決定基因的影響
        3.2.5 干擾egl-4基因后對(duì)線蟲性別決定基因的影響
        3.2.6 干擾fox-1基因后對(duì)線蟲性別決定基因的影響
4 討論
    4.1 武昌羅索線營(yíng)養(yǎng)決定性別分化關(guān)鍵期的初步探索
    4.2 gld-1、mab-5、egl-4在雌雄線蟲不同發(fā)育期的表達(dá)情況及功能分析
    4.3 干擾基因gld-1、mab-5、egl-4、fox-1后對(duì)性別決定基因的影響
    4.4 小結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3802353