目的研究miR-149對直腸癌細胞活性、凋亡及輻照敏感性的影響及作用機制。方法運用實時熒光定量聚合酶鏈反應(qRT-PCR)檢測人結直腸上皮細胞HCEpiC、直腸癌細胞HT29中miR-149的表達;將miR-con組(轉(zhuǎn)染miR-con)、miR-149組(轉(zhuǎn)染miR-149 mimics)、miR-149+pcDNA組(共轉(zhuǎn)染miR-149 mimics和pcDNA)、miR-149+pcDNA-共激活相關精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶(CARM)1(共轉(zhuǎn)染miR-149 mimics和pcDNA-CARM1)、IR+miR-con組(轉(zhuǎn)染miR-con)、IR+miR-149組(轉(zhuǎn)染miR-149 mimics)、IR+miR-149+pcDNA組(共轉(zhuǎn)染miR-149 mimics和pcDNA)、IR+miR-149+pcDNA-CARM1(共轉(zhuǎn)染miR-149 mimics和pcDNA-CARM1)均用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染至HT29細胞,各IR組再進行4 Gy照射;噻唑鹽(MTT)法檢測各組細胞的活性;Western印跡檢測各組細胞中CARM1、B細胞淋巴瘤(Bcl-2)、Bcl-2相關X蛋白(B...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 細胞培養(yǎng)
    1.3 細胞轉(zhuǎn)染與分組
    1.4 qRT-PCR
    1.5 Western印跡
    1.6 雙熒光素酶報告基因檢測實驗
    1.7 MTT實驗
    1.8 Annexin V-FITC/PI雙染實驗
    1.9 克隆形成實驗
    1.10 統(tǒng)計學分析
2 結 果
    2.1 結直腸癌細胞中miR-149和CARM1的表達
    2.2 miR-149靶向CARM1
    2.3 過表達CARM1逆轉(zhuǎn)了過表達miR-149對結直腸癌HT29細胞活性的影響
    2.4 過表達CARM1逆轉(zhuǎn)了過表達miR-149對結直腸癌HT29細胞凋亡的影響
    2.5 過表達CARM1逆轉(zhuǎn)了過表達miR-149對結直腸癌HT29細胞輻照敏感性的影響
    2.6 過表達CARM1逆轉(zhuǎn)了過表達miR-149對輻照結直腸癌HT29細胞凋亡蛋白的影響
3 討 論



本文編號：3754523