我國(guó)人多地少、農(nóng)業(yè)基礎(chǔ)還比較薄弱,糧食安全問(wèn)題更是關(guān)系國(guó)家安全、關(guān)系國(guó)民健康的戰(zhàn)略問(wèn)題。小麥?zhǔn)侵匾募Z食作物之一,而干旱是影響小麥產(chǎn)量的限制因素之一,隨著全球氣候變暖以及人口增長(zhǎng),導(dǎo)致局部干旱狀況頻頻發(fā)生,在我國(guó)已經(jīng)成為主要的自然災(zāi)害之一。研究結(jié)果表明ABA能夠啟動(dòng)植物體內(nèi)應(yīng)激反應(yīng),誘導(dǎo)基因、蛋白的表達(dá)從而提高植物抵御逆境脅迫的能力,9-順式-環(huán)氧類胡蘿卜素雙加氧酶(NCED)是ABA合成的關(guān)鍵酶,研究表明,干旱脅迫可以誘導(dǎo)NCED基因表達(dá)和內(nèi)源ABA的積累,且在一定范圍內(nèi),該基因的表達(dá)與ABA積累隨脫水延長(zhǎng)而明顯增強(qiáng),這說(shuō)明NCED基因在提高植物抗旱能力方面具有重要研究?jī)r(jià)值。本研究以未轉(zhuǎn)基因小麥(WT)和T3代轉(zhuǎn)TaNCED1基因株系,包括過(guò)表達(dá)(OE)、RNAi和基因編輯株系(nced)為材料,在5葉期進(jìn)行干旱脅迫處理,分別在不同的時(shí)間點(diǎn)0 d、2 d、4 d、6 d以及干旱復(fù)水后7 d取樣進(jìn)行相關(guān)生理指標(biāo)測(cè)定,例如葉片的相對(duì)含水量、丙二醛(MDA)、相對(duì)電導(dǎo)率、超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、過(guò)氧化物酶(POD)、可溶性糖和脯氨酸(Pro)含量測(cè)定,另外對(duì)干旱處理...

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
1 引言
    1.1 干旱對(duì)植物生長(zhǎng)的影響
    1.2 植物對(duì)干旱的響應(yīng)
        1.2.1 滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)對(duì)干旱脅迫的響應(yīng)
        1.2.2 SOD、CAT、POD等氧化酶及MDA對(duì)干旱脅迫的響應(yīng)
    1.3 小麥抗旱研究進(jìn)展
        1.3.1 干旱對(duì)小麥生長(zhǎng)生理影響
        1.3.2 栽培措施提高小麥抗旱性
        1.3.3 小麥抗旱基因
    1.4 NCED的研究進(jìn)展
    1.5 研究目的與意義
2 材料與方法
    2.1 材料
    2.2 研究方法
        2.2.1 轉(zhuǎn)基因植株的分子生物學(xué)檢測(cè)
            2.2.1.1 DNA提取
            2.2.1.2 PCR擴(kuò)增
            2.2.1.3 Bar試紙條檢測(cè)
            2.2.1.4 RNA提取
            2.2.1.5 反轉(zhuǎn)錄合成c DNA
            2.2.1.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
            2.2.1.7 Hi-tom檢測(cè)突變類型
        2.2.2 轉(zhuǎn)基因植株的抗旱性分析
            2.2.2.1 干旱脅迫處理
            2.2.2.2 生理指標(biāo)測(cè)定
            2.2.2.3 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序
        2.2.3 數(shù)據(jù)處理
3 結(jié)果與分析
    3.1 轉(zhuǎn)基因植株分子生物學(xué)檢測(cè)結(jié)果
    3.2 干旱脅迫對(duì)葉片相對(duì)含水量的影響
    3.3 干旱脅迫對(duì)膜脂氧化的影響
        3.3.1 干旱脅迫對(duì)相對(duì)電導(dǎo)率影響
        3.3.2 干旱脅迫對(duì)丙二醛含量影響
    3.4 干旱脅迫對(duì)SOD、CAT、POD氧化酶活性的影響
        3.4.1 干旱脅迫對(duì)SOD活性影響
        3.4.2 干旱脅迫對(duì)POD活性影響
        3.4.3 干旱脅迫對(duì)CAT活性影響
    3.5 干旱脅迫對(duì)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)影響
        3.5.1 干旱脅迫對(duì)可溶性總糖含量的影響
        3.5.2 干旱脅迫對(duì)脯氨酸含量的影響
    3.6 轉(zhuǎn)錄組解析TaNCED1 基因抗旱的分子機(jī)制
        3.6.1 測(cè)序數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估
        3.6.2 參考基因組比對(duì)
        3.6.3 基因表達(dá)水平分析
        3.6.4 差異表達(dá)分析
        3.6.5 差異基因維恩圖
        3.6.6 差異基因的聚類
        3.6.7 干旱脅迫后過(guò)表達(dá)TaNCED1 基因?qū)D(zhuǎn)錄組的影響
        3.6.8 干旱處理后基因編輯TaNCED1 基因?qū)D(zhuǎn)錄組的影響
4 討論
    4.1 干旱脅迫對(duì)相對(duì)含水量的影響
    4.2 干旱脅迫對(duì)膜脂氧化的影響
    4.3 干旱脅迫對(duì)SOD、CAT、POD氧化酶活性的影響
    4.4 干旱對(duì)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的影響
    4.5 相關(guān)基因表達(dá)分析
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3752240