發(fā)布時(shí)間：2023-02-14 10:14

　　由Ga、Gβ和Gγ三個(gè)亞基構(gòu)成的異三聚體G蛋白是一類重要的信號(hào)傳導(dǎo)分子。Gγ亞基對(duì)于植物G蛋白功能的發(fā)揮極其重要,可分為A、B、C三種類型。其中,C型為植物所特有。已知的C型Gγ對(duì)作物的產(chǎn)量和品質(zhì)性狀具有重要的調(diào)控作用。黃瓜是我國(guó)設(shè)施栽培的主要蔬菜。本文對(duì)黃瓜的C型Gγ同源基因的功能進(jìn)行了初步研究。主要研究結(jié)果有:(1)黃瓜基因組含有5個(gè)Gγ同源基因:CsGG1(黃瓜基因組ID,Csa2G228360)、CsGG2.1(Csa2G215490)、CsGG2.2(Csa3G144190)、CsGG3.1(Csa2G000110)和 CsGG3.2(CsalG597050)。CsGG3.1 和 CsGG3.2 編碼的蛋白屬于 C 型 Gγ。CsGG3.1-1的表達(dá)受白粉病誘導(dǎo),CsGG3.1-2的表達(dá)水平在鹽脅迫下顯著升高,而CsGG3.2的表達(dá)則受低溫誘導(dǎo)。(2)過表達(dá)CsGG3.1-2提高了鹽脅迫下擬南芥SOS途徑基因的表達(dá)水平,增強(qiáng)了轉(zhuǎn)基因植株的耐鹽能力;而在黃瓜中抑制CsGG3.1-2的表達(dá),增加了轉(zhuǎn)基因黃瓜幼苗對(duì)鹽脅迫的敏感性,表明CsGG3.1-2正調(diào)控黃瓜的鹽脅迫響應(yīng)。(3)...

【文章頁(yè)數(shù)】：76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞(Abbreviations)
1 引言
    1.1 植物GTP結(jié)合蛋白的種類和特性
    1.2 植物G蛋白的調(diào)控模式
    1.3 植物G蛋白的功能與作用機(jī)制
    1.4 植物低溫脅迫與鹽脅迫信號(hào)途徑研究進(jìn)展
    1.5 本研究的目的與意義
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料和培養(yǎng)條件
        2.1.1 黃瓜培養(yǎng)與處理?xiàng)l件
        2.1.2 擬南芥培養(yǎng)條件
    2.2 黃瓜Gγ基因家族全基因組鑒定及序列獲取
    2.3 過表達(dá)載體與反義載體構(gòu)建
    2.4 擬南芥轉(zhuǎn)基因方法
    2.5 黃瓜轉(zhuǎn)基因方法
    2.6 擬南芥低溫存活率測(cè)定方法
    2.7 黃瓜冷害指數(shù)測(cè)定方法
    2.8 抗氧化酶活性測(cè)定方法
    2.9 活性氧測(cè)定方法
    2.10 MDA含量測(cè)定方法
    2.11 活性氧的NBT和DAB染色法檢測(cè)
    2.12 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)
    2.13 數(shù)據(jù)分析
3 試驗(yàn)結(jié)果
    3.1 黃瓜C型Gγ基因?qū)ι锩{迫與非生物脅迫的響應(yīng)
        3.1.1 黃瓜Gγ基因的確定及生物信息學(xué)的分析
        3.1.2 Gγ基因在黃瓜不同組織中的表達(dá)情況
        3.1.3 黃瓜Gγ基因轉(zhuǎn)錄本對(duì)低溫脅迫的響應(yīng)
        3.1.4 黃瓜Gγ基因轉(zhuǎn)錄本對(duì)鹽脅迫的響應(yīng)
        3.1.5 接種白粉病菌對(duì)黃瓜Gγ基因轉(zhuǎn)錄水平的影響
        3.1.6 黃瓜Gγ基因轉(zhuǎn)錄本對(duì)氧化脅迫的響應(yīng)
    3.2 黃瓜C型Gγ CsGG3.1-2參與鹽脅迫響應(yīng)的調(diào)控
        3.2.1 超表達(dá)CsGG3.1-2增強(qiáng)了擬南芥耐鹽性
        3.2.2 CsGG3.1-2抑制表達(dá)對(duì)黃瓜耐鹽性的影響
    3.3 黃瓜C型Gγ CsGG3.2對(duì)黃瓜低溫響應(yīng)的調(diào)控
        3.3.1 過表達(dá)CsGG3.2提高了黃瓜幼苗的低溫耐性
        3.3.2 過表達(dá)CsGG3.2提高了轉(zhuǎn)基因黃瓜的CBF和COR基因表達(dá)水平
        3.3.3 過表達(dá)CsGG3.2提高了轉(zhuǎn)基因黃瓜在低溫下的抗氧化能力
4 討論
    4.1 CsGG3.1-2對(duì)鹽響應(yīng)的調(diào)控
    4.2 CsGG3.2對(duì)低溫響應(yīng)的調(diào)控
5 結(jié)論
    5.1 結(jié)論
    5.2 下一步研究計(jì)劃
參考文獻(xiàn)
致謝
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