目的利用5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)誘導C57BL/6J小鼠神經(jīng)管畸形(neural tube defects,NTDs),觀察5-FU對NTDs胎鼠腦組織基因表達的影響。方法采用無特定病原體(specific pathogen free,SPF)級C57BL/6J小鼠,孕鼠隨機分為實驗組和對照組。在孕7.5 d時,實驗組孕鼠腹腔注射12.5 mg/kg的5-FU(葉酸相關(guān)代謝通路中關(guān)鍵酶胸苷酸合成酶抑制劑);對照組孕鼠腹腔注射等體積的生理鹽水。孕13.5 d時通過體視顯微鏡及HE染色觀察胎鼠畸形及神經(jīng)管發(fā)育情況。在此基礎(chǔ)上利用表達譜芯片分析NTDs胎鼠腦組織中基因表達的變化,并利用實時熒光定量PCR進行驗證。統(tǒng)計學方法采用t檢驗。結(jié)果實驗組小鼠NTDs的發(fā)生率為42.3%(22/52),主要為露腦畸形;對照組無一例NTDs。HE染色可見NTDs胎鼠的端腦和后腦結(jié)構(gòu)紊亂。表達譜芯片篩選出差異表達基因137個,其中表達上調(diào)的基因40個,表達下調(diào)的基因97個,這些基因主要參與了多器官發(fā)育、細胞增殖及分化等生物過程以及與腦部發(fā)育相關(guān)的重要通路。選擇表達差異明顯且與胚...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 動物模型的建立
    1.2 表達譜芯片檢測
    1.3 實時熒光定量PCR檢測
    1.4 統(tǒng)計學方法
2 結(jié)果
    2.1 5-FU誘導小鼠NTDs的結(jié)果
    2.2 HE染色結(jié)果
    2.3 5-FU對小鼠胚胎腦組織基因表達的影響
3 討論



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