目的研究干細(xì)胞白血病(SCL)基因藥物對(duì)糖尿病膀胱病(DCP)豚鼠受損膀胱Cajal樣間質(zhì)細(xì)胞(ICCs)表面c-kit蛋白表達(dá)的影響。方法選取60只健康豚鼠單次腹腔注射1%鏈脲佐菌素(STZ)200 mg·kg^-1構(gòu)建豚鼠糖尿病膀胱病模型。按隨機(jī)數(shù)字表法將27只糖尿病膀胱病豚鼠隨機(jī)分為3組:實(shí)驗(yàn)組、陽(yáng)性對(duì)照組和空白對(duì)照組,每組9只。實(shí)驗(yàn)組單次尿道灌注SCL基因重組慢病毒藥物(滴度2×10⁷ U)0.2 mL,陽(yáng)性對(duì)照組單次尿道灌注空慢病毒液(不含SCL基因)0.2 mL,空白對(duì)照組單次尿道灌注磷酸鹽緩沖液(PBS)0.2 mL。每組每次各選取3只豚鼠于灌注后第7,14,28天麻醉后取其膀胱,提取培養(yǎng)DCP豚鼠膀胱ICCs,于倒置顯微鏡下觀察其細(xì)胞形態(tài),將用綠色熒光抗體標(biāo)記的ICCs置于激光共聚焦顯微鏡下檢測(cè)ICCs細(xì)胞熒光強(qiáng)度,采用Western blotting檢測(cè)ICCs表面c-kit蛋白的表達(dá)。結(jié)果 SCL基因重組慢病毒在14 d時(shí)轉(zhuǎn)染效果最佳,激光共聚焦顯微鏡下觀察到實(shí)驗(yàn)組ICCs熒光強(qiáng)度和c-kit蛋白表達(dá)較其他兩組明顯增強(qiáng)(P&...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 動(dòng)物
    1.2 藥品與試劑
    1.3 儀器與設(shè)備
    1.4 模型制備
    1.5 動(dòng)物分組及給藥
    1.6 培養(yǎng)ICCs
    1.7 ICCs鑒定
    1.8 Western blotting檢測(cè)c-kit蛋白的表達(dá)
    1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 成功建立豚鼠DCP模型
    2.2 ICCs形態(tài)觀察
    2.3 免疫熒光
    2.4 c-kit蛋白表達(dá)結(jié)果
3 討論



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