目的:本實驗利用RNA干擾(RNA interference,RNAi)技術(shù)靶向沉默HOXA10基因,研究靶向沉默HOXA10基因聯(lián)合中藥川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)對K562/ADM細(xì)胞多藥耐藥的影響以及機制的探討,為臨床逆轉(zhuǎn)白血病多藥耐藥提供堅實的實驗依據(jù)。方法:1、根據(jù)篩選出的HOXA10 siRNA構(gòu)建特異性pGPHI/GFP/Neo-HOXA10 shRNA,應(yīng)用酶切電泳法、測序法進(jìn)行重組質(zhì)粒載體測定,重組質(zhì)粒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染K562/ADM 細(xì)胞,RT-PCR、Western blotting 檢測 HOXA10 mRNA 及 HOXA10蛋白表達(dá)水平的變化。沉默HOXA10基因后,MTT、FCM分別測定逆轉(zhuǎn)耐藥倍數(shù)、胞內(nèi)阿霉素(Adriamycin,Adr)平均熒光強度(mean fluorescence intensity, MFI),Western blotting 檢測 P-gp、MRP1 蛋白表達(dá)量的變化。2、TMP處理K562/ADM細(xì)胞,MTT檢測TMP逆轉(zhuǎn)耐藥倍數(shù),FCM檢測胞內(nèi)Adr MFI,Western blotting檢測TMP對...

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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引言
第一部分 靶向沉默HOXA10基因?qū)562/ADM細(xì)胞MDR的影響
    材料
    方法
    結(jié)果
    討論
第二部分 中藥TMP對K562/ADM細(xì)胞MDR的影響
    材料
    方法
    結(jié)果
    討論
第三部分 靶向沉默HOXA10基因聯(lián)合TMP對K562/ADM細(xì)胞多藥耐藥的影響以及機制的探討
    材料
    方法
    結(jié)果
    討論
全文總結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀碩士期間發(fā)表的文章和獲獎
致謝



本文編號：3736556