bHLH轉(zhuǎn)錄因子是植物第二大轉(zhuǎn)錄因子家族,在調(diào)節(jié)植物生長發(fā)育、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和逆境脅迫響應(yīng)等方面發(fā)揮著重要的作用。為了研究玉米bHLH家族基因在逆境脅迫響應(yīng)中的功能,本研究從玉米根組織中克隆了ZmbHLH161（AC:NC_AQK75074）基因。生物信息學(xué)分析表明:該基因包含3個外顯子, cDNA全長1460 bp,編碼序列全長1059 bp,編碼352個氨基酸;在玉米基因組中以單拷貝形式存在,功能未知;ZmbHLH161蛋白分子量為37.1kD,理論等電點為6.10,具有bHLH轉(zhuǎn)錄因子家族特有的保守結(jié)構(gòu)域,但不具跨膜結(jié)構(gòu),無信號肽,為親水性蛋白,蛋白二級結(jié)構(gòu)無規(guī)則卷曲所占比例最大,為42.05%。玉米原生質(zhì)體瞬時表達(dá)試驗表明,ZmbHLH161定位在細(xì)胞核內(nèi)。實時熒光定量PCR（qPCR）分析表明,正常生長條件下,ZmbHLH161主要在根系和幼胚中表達(dá);在脫水和干旱處理下,ZmbHLH161在玉米苗期葉片中上調(diào)表達(dá)。轉(zhuǎn)基因異源表達(dá)ZmbHLH161擬南芥株系經(jīng)不同濃度NaCl處理后,其根長與野生型差異不顯著,而不同濃度甘露醇處理后其根長優(yōu)于野生型。由此推測ZmbH... 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 植物材料及試劑
    1.2 Zmb HLH161 c DNA的克隆及生物信息學(xué)分析
        1.2.1 植物表達(dá)載體p YBA1132:Zmb HLH161:EGFP的構(gòu)建
        1.2.2 玉米原生質(zhì)體的提取及轉(zhuǎn)化
    1.3 玉米Zmb HLH161基因表達(dá)模式分析
    1.4 植物異源表達(dá)載體p YBA1132:Zmb HLH161的構(gòu)建及擬南芥遺傳轉(zhuǎn)化
        1.4.1 異源表達(dá)載體構(gòu)建
        1.4.2 轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌GV3101及侵染擬南芥
        1.4.3 轉(zhuǎn)基因擬南芥種子逆境處理
2 結(jié)果與分析
    2.1 玉米轉(zhuǎn)錄因子基因Zmb HLH161序列擴(kuò)增與生物信息學(xué)分析
    2.2 亞細(xì)胞定位結(jié)果與分析
    2.3 玉米Zmb HLH161在不同組織中的表達(dá)情況
    2.4 不同逆境處理對葉片和根中Zmb HLH161表達(dá)的影響
    2.5 轉(zhuǎn)基因擬南芥陽性植株鑒定
    2.6 轉(zhuǎn)基因擬南芥的耐鹽性分析
    2.7 轉(zhuǎn)基因擬南芥的耐甘露醇分析
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]我國玉米種業(yè)轉(zhuǎn)型升級的路徑與策略探討[J]. 劉天金,王玉璽,寧明宇,靖飛,董曉霞,王志敏,劉春青.  中國種業(yè). 2018(02)
[2]玉米ZmSAMS1基因在鹽、干旱等逆境脅迫下的表達(dá)分析[J]. 余愛麗,趙晉鋒,王高鴻,杜艷偉,李顏方,張正.  玉米科學(xué). 2016(03)
[3]轉(zhuǎn)錄因子概述[J]. 張艷馥,沙偉.  生物學(xué)教學(xué). 2009(10)
[4]轉(zhuǎn)錄因子在植物抗逆性上的應(yīng)用研究[J]. 羅賽男,楊國順,石雪暉,盧向陽,徐萍.  湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2005(02)



本文編號：3732322