發(fā)布時間：2022-12-18 08:35

　　短小蛇根草（Ophiorrhiza pumila）,隸屬茜草科（Rubiaceae）蛇根草屬（Ophiorrhiza）,是一種多年生雙子葉草本植物,全草含抗癌藥物喜樹堿（CPT）及其衍生物。喜樹堿衍生類藥物目前廣泛應用于癌癥臨床治療,但藥源的短缺成為研發(fā)和應用喜樹堿類化合物的巨大瓶頸。而植物次生代謝工程的發(fā)展為解決藥源短缺,提高藥用成分含量提供了一個很好的解決方案。本研究通過采用短小蛇根草轉錄組測序和基因工程手段,挖掘了參與調(diào)控喜樹堿生物合成的相關基因,初步研究了其功能,并獲得了高產(chǎn)喜樹堿的轉基因材料。1、根據(jù)與擬南芥基因序列比對注釋,選擇可能參與次生代謝合成調(diào)控的16條全長bHLH轉錄因子,進行后續(xù)分析。通過基因克隆、結構域以及功能預測、組織表達譜等,最終選擇OpMYC2L1和OpMYC2L2這兩條轉錄因子進行了功能研究。2、為了確認OpMYC2L1和OpMYC2L2在喜樹堿合成途徑中的作用,分別構建了OpMYC2L1和OpMYC2L2的過表達和抑制表達載體,在短小蛇根草體內(nèi)進行了功能驗證。通過轉基因毛狀根株系喜樹堿含量測定發(fā)現(xiàn),在過表達的株系中,喜樹堿的含量都上調(diào)了2倍以上,裂環(huán)馬... 

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

野生短小蛇根草注：A-根，B-莖，C-葉，D-花，E-蒴果，F(xiàn)-幼苗，G-植株，H-繪制圖（中國植物圖像庫）

圖1-2兩種已經(jīng)上市的喜樹堿類藥物Fig1-2Twokindsofcamptothecindrugshavebeenlisted

喜樹堿的結合位點圖

【參考文獻】：
期刊論文
[1]植物次生代謝產(chǎn)物-酚類化合物的研究進展[J]. 華曉雨,陶爽,孫盛楠,郭娜,閻秀峰,藺吉祥.  生物技術通報. 2017(12)
[2]藍果忍冬果實花青素含量及合成相關基因表達分析[J]. 黃寧,劉朋,霍俊偉,秦棟,張椿浩.  南方農(nóng)業(yè)學報. 2017(07)
[3]丹參SmbHLH37基因的克隆、亞細胞定位和表達分析[J]. 蘇嬌,楊娜,王曉帆,杜堂志,李莎莎,魯張?zhí)镒?曹曉燕.  農(nóng)業(yè)生物技術學報. 2017(06)
[4]13個廣西喜樹種源的喜樹堿含量分析[J]. 劉毅,蘇付保,粟本超,馮立新,蘭健花.  廣西林業(yè)科學. 2017(01)
[5]唐菖蒲GhMYC2基因啟動子的活性分析[J]. 劉超,梁佳惠,吳健,何俊娜,義鳴放.  中國科技論文. 2017(06)
[6]bHLH轉錄因子調(diào)控藥用植物萜類化合物生物合成的研究進展[J]. 張凱倫,羅祖良,郭玉華,石宏武,馬小軍.  中國現(xiàn)代中藥. 2017(01)
[7]植物bHLH轉錄因子在非生物脅迫中的功能研究進展[J]. 王翠,蘭海燕.  生命科學研究. 2016(04)
[8]喜樹堿類藥物的研究與開發(fā)[J]. 陳夢涵,楊鳴華,孔令義.  世界科學技術-中醫(yī)藥現(xiàn)代化. 2016(05)
[9]白木香AsMYC2蛋白的原核表達與純化[J]. 廖永翠,徐艷紅,張爭,魏建和.  藥學學報. 2016(04)
[10]新型喜樹堿類抗癌藥物的研究進展[J]. 劉丹,張龍,達飛,尚沛津,張娟,姚琳.  現(xiàn)代生物醫(yī)學進展. 2016(05)

碩士論文
[1]丹參bHLH類轉錄因子的基因克隆及功能初步研究[D]. 王曉榮.上海師范大學 2015



本文編號：3721737