發(fā)布時間：2022-12-18 00:20

　　[目的]移植物抗腫瘤（graft versus tumor,GvT）效應(yīng)是異基因造血干細(xì)胞移植（allogenic hematopoietic stem cell transplantation,alloHSCT）之后來自供者和受者的多種淋巴細(xì)胞一同參與的抑制腫瘤的效應(yīng)。肝臟作為一個富含造血干細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的器官,其移植物是否同樣具有GvT效應(yīng)尚未有報道。本文旨在驗證異基因肝移植的GvT效應(yīng)并探究其免疫學(xué)機制。[方法]我們通過構(gòu)建異基因和同基因小鼠原位肝移植后腫瘤生長的動物模型,觀察、測量肝移植后腫瘤的生長情況來驗證異基因肝移植的GvT效應(yīng);并通過建立免疫細(xì)胞組分清除的供體小鼠模型,利用免疫熒光技術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)、體外細(xì)胞共培養(yǎng)等免疫學(xué)研究常用的實驗技術(shù)探究異基因肝移植GvT效應(yīng)的免疫學(xué)機制。[結(jié)果]我們成功構(gòu)建小鼠原位肝移植后腫瘤生長的動物模型。異基因小鼠肝移植后肝外腫瘤生長明顯受到抑制,腫瘤細(xì)胞凋亡增加,而心臟移植則不出現(xiàn)此現(xiàn)象。肝移植后早期供肝來源淋巴細(xì)胞浸潤腫瘤,與肝移植的GvT效應(yīng)有關(guān)。構(gòu)建T、B細(xì)胞缺陷的供體后,異基因肝移植抗腫瘤現(xiàn)象消失,腫瘤浸潤免疫細(xì)胞明顯減少。異基因肝移... 

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
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1 前言
2 異基因小鼠肝移植后肝外腫瘤生長模型的構(gòu)建
    2.1 異基因小鼠原位肝移植模型的構(gòu)建
    2.2 小鼠肝移植后肝外腫瘤生長模型的構(gòu)建
    2.3 術(shù)后觀察和腫瘤測量
    2.4 標(biāo)本獲取與初步處理
    2.5 統(tǒng)計分析
    2.6 結(jié)果
3 異基因小鼠肝移植對肝外腫瘤生長具有抑制作用
    3.1 同、異基因小鼠肝移植后腫瘤生長模型
    3.2 小鼠異位心臟移植后腫瘤生長模型
    3.3 小鼠腫瘤標(biāo)本病理切片制作
    3.4 TUNEL法檢測肝外腫瘤內(nèi)細(xì)胞凋亡
    3.5 免疫熒光技術(shù)檢測腫瘤內(nèi)淋巴細(xì)胞浸潤
    3.6 統(tǒng)計分析
    3.7 結(jié)果
4 腫瘤生長抑制與異基因肝移植后早期腫瘤內(nèi)供肝來源淋巴細(xì)胞浸潤有關(guān)
    4.1 C57BL/6-EGFP小鼠作供體的小鼠肝移植后腫瘤生長模型
    4.2 小鼠肝移植后延遲種植腫瘤模型
    4.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測供肝來源免疫細(xì)胞在受體內(nèi)的分布
    4.4 統(tǒng)計分析
    4.5 結(jié)果
5 供肝來源T、B淋巴細(xì)胞通過募集受體T細(xì)胞發(fā)揮抗腫瘤作用
    5.1 預(yù)實驗:免疫細(xì)胞清除的供體小鼠模型構(gòu)建
    5.2 小鼠肝移植后腫瘤生長模型
    5.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測組織內(nèi)免疫細(xì)胞分類
    5.4 免疫熒光技術(shù)檢測腫瘤內(nèi)淋巴細(xì)胞浸潤
    5.5 統(tǒng)計分析
    5.6 結(jié)果
6 異基因肝移植后腫瘤浸潤的受體T細(xì)胞活化增加
    6.1 小鼠肝移植后腫瘤生長模型
    6.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測腫瘤浸潤T細(xì)胞活化情況
    6.3 統(tǒng)計分析
    6.4 結(jié)果
7 體外實驗:異基因淋巴細(xì)胞較同基因有更強的殺傷活性
    7.1 原代淋巴細(xì)胞分離純化
    7.2 熒光染料CFSE標(biāo)記CT26腫瘤細(xì)胞
    7.3 細(xì)胞體外共培養(yǎng)實驗
    7.4 AnnexinV法檢測CT26細(xì)胞凋亡
    7.5 統(tǒng)計分析
    7.6 結(jié)果
8 討論
9 結(jié)論
10 參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
作者簡歷及在學(xué)期間所取得的科研成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Overview of immunosuppression in liver transplantation[J]. Anjana A Pillai,Josh Levitsky.  World Journal of Gastroenterology. 2009(34)
[2]Review on immunosuppression in liver transplantation[J]. Maryam Moini,Michael L Schilsky,Eric M Tichy.  World Journal of Hepatology. 2015(10)
[3]Role of surgery in colorectal cancer liver metastases[J]. ?zgür Akgül, Erdin? ?etinkaya,?iyar Ers?z,Mesut Tez.  World Journal of Gastroenterology. 2014(20)
[4]Liver transplantation: Current status and challenges[J]. Caroline C Jadlowiec,Timucin Taner.  World Journal of Gastroenterology. 2016(18)



本文編號：3720945