法氏柴胡寬蛾Depressaria falkovitshi Lvovsky作為本課題組在2013年發(fā)現(xiàn)的中國新紀(jì)錄種,是我國柴胡種植區(qū)的一種優(yōu)勢害蟲,主要以幼蟲取食危害柴胡種子、嫩葉、莖尖和花蕾,蟲害大發(fā)生時危害率可達90%,嚴(yán)重影響了柴胡的產(chǎn)量和品質(zhì)。由于其繁殖力強、自然天敵少且具有卷葉習(xí)性等特點難以防治。研究法氏柴胡寬蛾的氣味結(jié)合蛋白有助于深入了解昆蟲的嗅覺機制,可進一步研究法氏柴胡寬蛾與寄主植物的關(guān)系,進而為研發(fā)相關(guān)的引誘劑、趨避劑等新型藥劑提供新思路。為此,本研究利用法氏柴胡寬蛾轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),通過生物信息學(xué)和分子生物學(xué)相結(jié)合的方法,從法氏柴胡寬蛾中克隆了2個氣味結(jié)合蛋白基因,并對其進行了體外表達,測定了它們的表達譜。主要研究結(jié)果如下:1.結(jié)合法氏柴胡寬蛾成蟲轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析并利用RT-PCR技術(shù),本研究成功克隆得到兩個氣味結(jié)合蛋白基因DfalOBP1（GenBank登錄號:MG882075）和DfalOBP3（GenBank登錄號:MG882077）。DfalOBP1基因開放閱讀框長420bp,編碼139個氨基酸,N-末端包含18個氨基酸組成的信號肽,預(yù)測蛋白分子量大小為16.22... 

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
1 引言
    1.1 法氏柴胡寬蛾
        1.1.1 法氏柴胡寬蛾形態(tài)特征
        1.1.2 法氏柴胡寬蛾危害特點
        1.1.3 法氏柴胡寬蛾的研究現(xiàn)狀
    1.2 嗅覺感器
    1.3 嗅覺感受機制
    1.4 氣味結(jié)合蛋白研究進展
        1.4.1 種類
        1.4.2 分布
        1.4.3 生化特性
        1.4.4 生理功能
        1.4.5 三維結(jié)構(gòu)
        1.4.6 配體的結(jié)合和釋放機制
        1.4.7 研究方法
    1.5 本研究的目的和意義
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 供試?yán)ハx
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要設(shè)備儀器
    2.2 方法
        2.2.1 基因擴增
        2.2.2 構(gòu)建表達載體
        2.2.3 蛋白表達
        2.2.4 內(nèi)參基因的篩選
        2.2.5 組織表達
3 結(jié)果與分析
    3.1 基因分析
        3.1.1 總RNA提取質(zhì)量檢測
        3.1.2 DfalOBP1和DfalOBP3 基因序列分析
        3.1.3 DfalOBP1和DfalOBP3 三維結(jié)構(gòu)模擬
        3.1.4 DfalOBP1和DfalOBP3 序列比對分析
        3.1.5 DfalOBP1和DfalOBP3 系統(tǒng)進化分析
    3.2 蛋白表達
    3.3 內(nèi)參基因篩選
        3.3.1 候選內(nèi)參基因的克隆及熒光定量引物分析
        3.3.2 候選內(nèi)參基因的表達水平
        3.3.3 候選內(nèi)參基因的表達穩(wěn)定性分析
    3.4 組織表達
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
附件
作者簡歷
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]梨小食心蟲Minus-C氣味結(jié)合蛋白的分子克隆、表達譜及結(jié)合特性分析[J]. 陳秀琳,蘇麗,陳麗慧,李怡萍,仵均祥,李廣偉.  昆蟲學(xué)報. 2018(07)
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碩士論文
[1]三島柴胡昆蟲群落結(jié)構(gòu)及主要害蟲生物學(xué)特性的研究[D]. 萬喻.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]甜菜夜蛾氣味結(jié)合蛋白的基因克隆、組織分布及配體結(jié)合能力分析[D]. 張婷.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012



本文編號：3712423