光裸星蟲(chóng)（Sipunculus nudus）具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和生態(tài)價(jià)值,現(xiàn)有的光裸星蟲(chóng)繁殖生物學(xué)研究薄弱,制約了人工繁育技術(shù)的提高。光裸星蟲(chóng)生殖細(xì)胞在體腔液中游離發(fā)育,不同發(fā)育時(shí)期的卵母細(xì)胞各自獨(dú)立。本研究利用超微結(jié)構(gòu)觀察結(jié)合轉(zhuǎn)錄組測(cè)序認(rèn)識(shí)光裸星蟲(chóng)卵母細(xì)胞發(fā)育的分子生物學(xué)過(guò)程,篩選關(guān)鍵基因并進(jìn)行克隆和表達(dá)驗(yàn)證。研究結(jié)果可為光裸星蟲(chóng)生殖調(diào)控及人工育苗提供數(shù)據(jù)支撐和理論指導(dǎo),也可為無(wú)脊椎動(dòng)物卵子發(fā)生的分子機(jī)制研究積累基礎(chǔ)資料。具體研究結(jié)果如下:1、利用光鏡和電子顯微鏡觀察了光裸星蟲(chóng)卵母細(xì)胞、胚胎及幼體發(fā)育過(guò)程,結(jié)果表明:（1）可依據(jù)卵母細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)及存在場(chǎng)所的變化將發(fā)育過(guò)程劃分為6個(gè)階段,其中Egg1-Egg4在體腔液中發(fā)育,為卵母細(xì)胞生長(zhǎng)階段,主要進(jìn)行各種物質(zhì)的合成和積累;Egg5在腎管中發(fā)育,生發(fā)泡發(fā)生破裂（GVBD）;Egg6為排放到水體中的卵母細(xì)胞。（2）確定了Egg1-Egg4與卵徑之間存在對(duì)應(yīng)關(guān)系,可利用細(xì)胞篩進(jìn)行分級(jí)分離。（3）胚胎及幼體發(fā)育經(jīng)歷卵裂、囊胚、原腸胚、擔(dān)輪幼蟲(chóng)、海球幼體、匍匐幼體等主要階段,從卵裂到擔(dān)輪幼蟲(chóng)均在卵黃膜內(nèi)發(fā)育;海球幼體出膜即可快速游動(dòng),以浮游植物... 

【文章頁(yè)數(shù)】：156 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 星蟲(chóng)動(dòng)物簡(jiǎn)介
    2 星蟲(chóng)動(dòng)物繁殖生物學(xué)研究進(jìn)展
    3 卵母細(xì)胞發(fā)育過(guò)程研究
    4 無(wú)脊椎動(dòng)物性腺或生殖細(xì)胞發(fā)育相關(guān)基因研究
        4.1 熱休克蛋白基因
        4.2 成熟促進(jìn)因子MPF
        4.3 卵黃蛋白原
        4.4 皮質(zhì)顆粒的相關(guān)蛋白
        4.5 血凝素/變形細(xì)胞聚集因子
        4.6 鐵蛋白
    5 轉(zhuǎn)錄組學(xué)在性腺發(fā)育研究中的應(yīng)用
    6 研究目的與意義
第二章 光裸星蟲(chóng)卵母細(xì)胞及胚胎幼體發(fā)育過(guò)程的觀察
    1 材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 所用儀器設(shè)備
        1.3 主要試劑
        1.4 樣品制樣與觀察
    2 結(jié)果
        2.1 卵母細(xì)胞發(fā)育觀察
        2.2 胚胎幼體發(fā)育觀察
    3 討論
        3.1 光裸星蟲(chóng)卵母細(xì)胞發(fā)育
        3.2 光裸星蟲(chóng)胚胎幼體發(fā)育
第三章 光裸星蟲(chóng)卵母細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測(cè)序與分析
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
        2.1 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)過(guò)濾
        2.2 Denovo組裝和質(zhì)量評(píng)估
        2.3 基因注釋
        2.4 基因定量
        2.5 轉(zhuǎn)錄組差異表達(dá)基因檢測(cè)
        2.6 代謝通路富集分析
        2.7 卵母細(xì)胞發(fā)育相關(guān)基因篩選
    3 討論
        3.1 轉(zhuǎn)錄組基礎(chǔ)分析
        3.2 卵母細(xì)胞周期界定
        3.3 卵母細(xì)胞發(fā)育相關(guān)基因
第四章 光裸星蟲(chóng)定量分析實(shí)驗(yàn)中內(nèi)參基因的篩選
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
        2.1 光裸星蟲(chóng)全組織內(nèi)參篩選
        2.2 卵母細(xì)胞內(nèi)參篩選
    3 討論
        3.1 全組織內(nèi)參篩選
        3.2 卵母細(xì)胞內(nèi)參篩選
第五章 光裸星蟲(chóng)卵母細(xì)胞發(fā)育相關(guān)基因的克隆及表達(dá)分析
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
        2.1 光裸星蟲(chóng)Vg基因的克隆及表達(dá)分析
        2.2 光裸星蟲(chóng)Peritrophin基因的克隆及表達(dá)分析
        2.3 光裸星蟲(chóng)FoxL2 基因的克隆及表達(dá)分析
        2.4 光裸星蟲(chóng)Ferritin基因的克隆及表達(dá)分析
        2.5 光裸星蟲(chóng)Hsp90 基因的克隆及表達(dá)分析
    3 討論
        3.1 光裸星蟲(chóng)Vg基因的生物信息學(xué)及表達(dá)分析
        3.2 光裸星蟲(chóng)Peritrophin基因的生物信息學(xué)及表達(dá)分析
        3.3 光裸星蟲(chóng)FoxL2 基因的的生物信息學(xué)及表達(dá)分析
        3.4 光裸星蟲(chóng)Ferritin基因的的生物信息學(xué)及表達(dá)分析
        3.5 光裸星蟲(chóng)Hsp90 基因的的生物信息學(xué)及表達(dá)分析
第六章 自動(dòng)化小型養(yǎng)殖設(shè)施的設(shè)計(jì)
    1 小水體降溫系統(tǒng)
    2 微型調(diào)頻氣泵
    3 微粒飼料投料裝置
    4 微粒飼料混合和分配裝置
第七章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
導(dǎo)師簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]斑馬魚(yú)早期胚胎發(fā)育囊胚sphere時(shí)期的蛋白組學(xué)研究[J]. 陳漪,胡瑞芹,冉皓宇,陳良標(biāo).  海洋漁業(yè). 2019(01)
[2]光裸星蟲(chóng)（Sipunculus nudus）不同發(fā)育時(shí)期卵細(xì)胞內(nèi)參基因的篩選[J]. 張家煒,鄔婧,周丹,鄭哲,王慶恒.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2020(02)
[3]組蛋白H3變體H3.3及其在細(xì)胞重編程中的作用[J]. 黃星衛(wèi),程香榮,王楠,張雨薇,廖辰,金連弘,雷蕾.  遺傳. 2018(03)
[4]大鯢不同發(fā)育階段及組織中內(nèi)參基因穩(wěn)定性評(píng)價(jià)[J]. 崔丹,藍(lán)青景,劉然然,王立新.  西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2017(10)
[5]豬睪丸組織定量PCR分析中內(nèi)參基因的選擇[J]. 彭馥芝,冉茂良,翁波,李智,董蓮花,陳斌.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(15)
[6]平歐雜種榛實(shí)時(shí)熒光定量PCR內(nèi)參基因的篩選與體系建立[J]. 楊丹,李清,王貴禧,馬慶華,朱利泉.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(12)
[7]紅苞鳳梨實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析中內(nèi)參基因的篩選[J]. 李瑞雪,余三淼,李夏,熊穎媛,藺珍,唐琰琪,馬均.  熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào). 2017(03)
[8]光裸星蟲(chóng)體腔液中卵子發(fā)生的超微結(jié)構(gòu)[J]. 王慶恒,張家煒,郝瑞娟,黃榮蓮,杜曉東.  海洋與湖沼. 2017(01)
[9]印度谷螟實(shí)時(shí)熒光定量PCR內(nèi)參基因的選擇[J]. 唐培安,張棋麟,薛昊,袁明龍.  中國(guó)科學(xué):生命科學(xué). 2016(10)
[10]水溫和鹽度對(duì)皺紋盤(pán)鮑“97”選群第6代變態(tài)及變態(tài)幼體生長(zhǎng)存活的影響[J]. 孔寧,連建武,薛艷潔,鐘兆山,李鵬,劉曉.  海洋科學(xué). 2016(10)

博士論文
[1]日本沼蝦雌性性早熟相關(guān)基因的篩選、克隆、表達(dá)與功能分析[D]. 江紅霞.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[2]克氏原螯蝦轉(zhuǎn)錄組測(cè)序數(shù)據(jù)發(fā)掘和性腺發(fā)育相關(guān)基因功能初步研究[D]. 姜虎成.上海海洋大學(xué) 2015
[3]刺參遺傳連鎖圖譜構(gòu)建及卵母細(xì)胞成熟過(guò)程研究[D]. 龐震國(guó).中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所） 2009
[4]日本沼蝦卵巢表達(dá)序列標(biāo)簽分析及生殖相關(guān)基因的克隆與表達(dá)[D]. 吳萍.華東師范大學(xué) 2009
[5]1.TBP和TLP對(duì)hTERT的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)作用及機(jī)制 2.DNA甲基化在宮頸癌診斷中的應(yīng)用[D]. 楊楠.北京大學(xué) 2008
[6]生長(zhǎng)分化因子-9與FOXL2在卵巢組織中的表達(dá)與調(diào)控研究[D]. 曲中玉.山東大學(xué) 2006

碩士論文
[1]曼氏無(wú)針烏賊雌激素受體基因的克隆、表達(dá)及生殖調(diào)控功能初探[D]. 劉婉.浙江海洋大學(xué) 2016
[2]中華絨螯蟹性早熟分子機(jī)制的初步研究[D]. 慈元吉.上海海洋大學(xué) 2015
[3]孕激素（DHP）在硬骨魚(yú)類(lèi)減數(shù)分裂啟動(dòng)過(guò)程中的作用機(jī)制研究[D]. 劉剛.西南大學(xué) 2014
[4]尼羅羅非魚(yú)性腺發(fā)育過(guò)程的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究及Fox家族生物信息學(xué)分析[D]. 袁靜.西南大學(xué) 2013
[5]櫛孔扇貝（Chlamys Farreri）兩個(gè)卵黃蛋白原轉(zhuǎn)錄本的發(fā)育表達(dá)圖式[D]. 李昀.中國(guó)海洋大學(xué) 2011
[6]養(yǎng)殖中華鱘卵黃發(fā)生研究[D]. 甘芳.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[7]擬穴青蟹細(xì)胞周期及泛素系統(tǒng)若干基因參與性腺發(fā)育的研究[D]. 韓坤煌.集美大學(xué) 2010
[8]MPF對(duì)精母細(xì)胞減數(shù)分裂調(diào)控作用的研究[D]. 白汝嵐.西南大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3711159