目的:分析氧化固醇結(jié)合樣蛋白2（oxysterol binding protein-like 2,OSBPL2）基因缺陷型巴馬小型豬肥胖相關(guān)的表型特征和可能機(jī)制。方法:將3月齡野生型（wild type,WT）和OSBPL2缺陷型（mutant type,MT）巴馬小型豬飼喂高脂飼料（high fat diet,HFD）。喂食9個月后檢測體重、皮下脂肪厚度,HE染色觀察肝臟脂肪變性,電鏡觀察肝臟組織亞細(xì)胞結(jié)構(gòu),檢測血清甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶等生化指標(biāo),實(shí)時熒光定量PCR（qRT-PCR）法檢測肝臟脂肪合成分化相關(guān)基因的變化,Western blot及免疫組織化學(xué)法檢測脂肪酸結(jié)合蛋白4（adipocyte fatty acid binding protein 4,FABP4）及酰基輔酶A氧化酶1（acylcoenzyme A oxidase 1,ACOX1）蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:MT-HFD組體重、皮下脂肪厚度明顯高于WT-HFD組（P＜0.05）;HE染色結(jié)果顯示,MT-HFD組脂肪細(xì)胞顯著增大（P＜0.001）... 

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 組織標(biāo)本采集
        1.2.2 HE染色和免疫組化染色
        1.2.3 血脂生化檢測
        1.2.4 電鏡觀察以及MAM長度的計算
        1.2.5 實(shí)時定量PCR
        1.2.6 蛋白質(zhì)免疫印跡
    1.3 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 同月齡巴馬小型豬體重及皮下脂肪檢測
    2.2 同月齡巴馬小型豬皮下脂肪細(xì)胞面積的比較
    2.3 同月齡巴馬小型豬血脂分析
    2.4 同月齡巴馬小型豬肝組織結(jié)構(gòu)及肝功能生化分析
    2.5 電鏡下同月齡巴馬小型豬肝細(xì)胞MAM比較
    2.6 巴馬小型豬肝細(xì)胞中脂肪合成代謝相關(guān)基因的表達(dá)檢測
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]OSBPL2-disrupted pigs recapitulate dual features of human hearing loss and hypercholesterolaemia[J]. Jun Yao,Huasha Zeng,Min Zhanga,Qinjun Wei,Ying Wang,Haiyuan Yang,Yajie Lu,Rongfeng Li,Qiang Xiong,Lining Zhang,Zhibin Chen,Guangqian Xing,Xin Cao,Yifan Dai.  Journal of Genetics and Genomics. 2019(08)
[2]FABP4通過上調(diào)GLUT1表達(dá)和有氧糖酵解促進(jìn)腸癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移[J]. 王克強(qiáng),戴文鵬,黃湖南,車河龍,鄧小榮.  南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2019(02)
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[4]基于CRISPR/Cas9技術(shù)建立敲除OSBPL2基因的HeLa細(xì)胞株[J]. 陳慶,魯雅潔,姚俊,魏欽俊,曹新.  南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2016(09)
[5]B超活體測定豬背膘厚和眼肌面積的研究[J]. 王重龍,陶立,張勤,張東紅,李慶崗,劉衛(wèi)東.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2005(03)



本文編號：3703344